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细胞详述
破骨细胞(osteoclast,亦称bone-resorbing cells)是骨组织成分的一种,行使骨吸收(bone resorption)的功能。破骨细胞与成骨细胞(osteoblast,亦称bone-forming cells)在功能上相对应。二者协同,在骨骼的发育和形成过程中发挥重要作用。高表达的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase)和组织蛋白酶K(cathepsin K)是破骨细胞主要标志。
细胞特性
1) 组织来源于人的正常关节组织。
2) 细胞鉴定:抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:圆形,不规则细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验亦称溶骨细胞。为多核的大形细胞,具有破坏吸收骨组织的功能。骨化时靠它进行从海绵骨质向致密骨质转变,以及髓腔的形成和骨外形的调整等。结果是它参与钙和磷的贮存与释放,因破骨细胞可被甲状旁腺激素活化,从而促进了骨基质的吸收,使血中钙和磷的含量增加。相反,鳃后腺( ultimobranchialgland)的降钙素( calcitonin)则可抑制其功能。此种细胞来源于骨髓的网状细胞,但也有认为是由造骨细胞一时性愈合而产生的。
luming10 求助,本人用RAW264.7细胞诱导破骨细胞一直失败,96孔板,2000个细胞/孔,RANKL50ng/ml,M-CSF25ng/ml,5到6天后TRAP染色一直没有看到理想的结果,各位前辈有做过这个实验的请传授经验,培养RAW264.7细胞的时候是否有些特别注意事项,如何使RAW264.7的状态达到最佳?以及关于TRAP染色有什么需要注意的,多谢 xxmchappyniu 同问,最近一个同事也要做RAW
3—5min后,取出放入培养皿中; 3. 用手术剪剪开其四肢皮肤、肌肉,取股骨和胫骨等长骨,放入盛缓冲液的培养皿中。除去骨表面的软组织、骨膜以及软骨; 4. 将除去骨膜等多余组织后的长骨干部分清洗后,置于盛有少量培养液的培养皿中。用手术刀或手术剪纵行剖开骨干。用手术刀轻刮骨的内表面,同时用尖吸管不断吸取培养皿中的培养液,冲洗骨内表面多次,直至骨内表面变白为止; 5. 用吸管吸打上述含碎骨片及分离细胞的培养液2—5min左右,使附着于碎骨片上的破骨细胞分离脱落于培养液中。静置1—2min
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