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- 2025年09月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本：
血清、血浆、组织、尿液等
- 标记物：
参考说明书
- 适应物种：
/
- 应用：
小鼠
- 检测方法：
ELISA
- 检测范围：
ELISA
- 库存：
9999
- 供应商：
上海蒂科生物
- 规格：
96T/48T
IL-6简介：
白介素6（IL-6）是一类多功能的蛋白，在宿主防御，急性期反应，免疫反应，造血功能，神经系统等方面起到重要的作用。根据来源不同，白介素6分子量从21到28kDa不同，但均为单链蛋白。白介素6在多种细胞中都有表达，如T细胞、巨噬细胞、纤维原细胞、肝细胞、血管内皮细胞等。由于IL-6具有不同的活性，所以IL-6也被称为干扰素β2(IFN-β2)、B细胞刺激因子-2(BSF-2)、杂交瘤细胞生长因子、肝细胞刺激因子、毒性T细胞分化因子、巨噬细胞粒细胞诱导因子(MGI
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-6的浓度。小鼠IL-6捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的小鼠IL-6会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-6抗体后，抗小鼠IL-6抗体与小鼠IL-6接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂，若样本中存在IL-6将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，小鼠IL-6浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-6浓度。
小鼠IL-6定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:
| 组分 | 规格（96T/48T） |
| 小鼠IL-6预包被板 | 12条/6条 |
| 样本分析缓冲液 | 5ml/3ml |
| 标准品稀释液 | 10ml/5ml |
| 小鼠IL-6标准品 | 4支/2支(冻干) |
| 小鼠IL-6生物素化抗体 | 10ml/5ml |
| 亲和素连接的HRP酶 | 10ml/5ml |
| 浓缩洗涤液 20× | 30ml/15ml |
| TMB底物 | 10ml/5ml |
| 中止液 | 5ml/3ml |
| 封板胶纸 | 3/2张 |
| 说明书 | 1份 |
1.通过计算并确定一次性实验所需的板条数，取出所需板条放置在框架内，暂时用不到板条请放回铝箔袋密封，保存于
2.建议设置本底较正孔，即空白孔,设置方法为该孔只加TMB显色液和中止液。每次实验均需做标准品对照并画出标准曲线。
3.分别将标本或不同浓度标准品(100ul/孔)加入相应孔中，用封板胶纸封住，室温（25～
4.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。
5.加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，室温（25～
6.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。
7.加入亲和素连接的HRP酶工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，避光室温（25～
8.洗板5次，且最后一次置厚吸水纸上拍干。
9.加入显色剂TMB100ul/孔，避光室温（25～
10.加入终止液50ul/孔,混匀后即刻测量OD450值。
结果判断:
1.复孔的值在20%的差异范围内结果才有效，复孔的值平均后可作为测量值。
2.每个标准品或标本的OD值应减去本底校正孔的OD值。
3.手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
4.若标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。
典型数值和参考曲线
| 浓度pg/ml | 典型OD值1 | 典型OD值2 | OD平均值 |
| 0 | 0.1123 | 0.1279 | 0.1201 |
| 31.25 | 0.3321 | 0.3764 | 0.35425 |
| 62.5 | 0.4143 | 0.4545 | 0.4344 |
| 125 | 0.5423 | 0.5761 | 0.5592 |
| 250 | 0.9524 | 0.9803 | 0.96635 |
| 500 | 1.4201 | 1.5021 | 1.4611 |
| 1000 | 2.1121 | 2.2231 | 2.1676 |
1.灵敏度：多次重复结果表明，最小检出量为12.8pg/ml。
2.特异性：与大鼠IL-6,人IL-6没有交叉反应。
3.重复性：板内，板间变异系数均<10%.
参考文献:
Van Snick, J. et al. (1990) Annu. Rev. Immunol. 8:253.
Taga, T. and T. Kishimoto (1997) Annu. Rev. Immunol. 15:797.
Chiu, C-P. et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:7099.
Hirano, T. et al. (1986) Nature 324:73.
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