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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 库存:
大量
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
干冰
- 英文名:
(S-180细胞)
- 规格:
详见说明书
培养条件
RPMI164010%FBS
细胞生长:悬浮生长
细胞形态:圆形
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:2。3天内可长满
细胞纯度:95%
细胞活力:87%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)
细胞用途:只可用于科研不可用于临床诊断和治疗
(S-180细胞)小鼠腹水瘤细胞处理程序
在培养瓶中接种细胞并在培养基中完全填充培养基以防止运输过程中细胞的丢失。
1、收到后,目视检查培养物是否有微生物污染的宏观证据。
使用倒置显微镜(配备有相位传感器),仔细检查是否有微生物污染的证据。还检查以确定大多数细胞是否仍然附着在烧瓶底部?在运输过程中,培养物有时被粗略地处理,并且许多细胞经常分离并悬浮在培养基中(但仍然是可行的)。
2、如果细胞仍然附着,无菌去除5至10毫升的运输介质。可以节省运输媒介以重复使用。在5%℃的空气中,在37℃下培养细胞,直到它们准备进行传代培养BGC-823人胃腺癌细胞(低分化)没有附着,无菌地移除烧瓶的全部内容物,并以1000rpm离心5至10分钟。取出运输介质并保存。在10毫升这种培养基中重新沉淀颗粒细胞并加入25厘米的烧瓶中。在空气中5%℃下,在37℃下孵育,直至细胞准备进行传代培养。
(S-180细胞)小鼠腹水瘤细胞冷冻保存程序
1、去除和丢弃培养基。
2、简要冲洗细胞层0.25(w/v)trypsin0.53mm EDTA溶液去除所有痕迹血清含有胰蛋白酶抑制剂。
3、加入2至3毫升的胰蛋白酶-EDTA溶液瓶中,倒置显微镜下观察细胞到细胞层是分散的(通常在1到10分钟)。
注意:为了避免结块,不要在击打或摇晃瓶子时搅拌细胞,等待细胞分离。难以分离的细胞可以放置在37°C以促进扩散。
4、加入6~8毫升的完整生长培养基,轻轻吸液,抽吸细胞。
5、去除胰酶EDTA溶液,将细胞悬液到离心管和旋转约5 1000rpmfor 10分钟。
6、低温保存培养液中的上清液和复苏细胞。
7、将细胞转移至低温瓶,1ml/瓶。
8、低温容器中的细胞Frozen(NalgENα5100-01)。
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文献和实验小鼠腹水及单细胞悬液制备流程 配制 6% 淀粉肉汤。 6% 淀粉肉汤配制方法:牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1.0g、氯化钠 0.5g、蒸馏水 100mL,上述材料混合加热后加入可溶性淀粉 6.0g;溶解后,121℃ 高压灭菌 15~20 min,EP 管分装封口,将肉汤放置于 4℃ 保存。 小鼠腹腔注射 1mL 6% 淀粉肉汤(注意避开肠管和内脏),刺激 60~72h。 颈椎脱臼法处死小鼠,用 75% 酒精浸泡小鼠 5min。 将小鼠置于解剖板中,固定四肢,剪开皮肤,充分暴露腹膜。 用眼
处理的瘤细胞作为肿瘤疫苗 肿瘤疫苗包括灭活的自体肿瘤细胞、提取的肿瘤抗原和人工合成的肿瘤抗原肽,通过给患者免疫接种,激发患者自身对肿瘤细胞的特异性免疫应答,清除肿瘤而不损伤周围正常细胞。肿瘤疫苗还可诱发免疫记忆细胞,产生长期的免疫效应,防止肿瘤的转移和复发。是一种理想的特异性主动免疫治疗手段。 肿瘤疫苗激活T细胞作用机制 肿瘤细胞表达的肿瘤抗原经APC加工处理,通过MHCI类和Ⅱ类分子提呈至细胞表面,分别激活CD
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