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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
小鼠肿瘤细胞分离液 1.070
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
200mL
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
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9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL规格详细介绍：
操作步骤:
1. 小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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小鼠基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA检测试剂盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T
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BSSA琼脂培养基 250g 用于果汁中嗜酸耐热菌的检测。
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胆盐乳糖培养基250g/瓶用于大肠菌群的测定incubationmedia胆盐乳糖培养基250g/瓶用于大肠菌群的测定
SOCMedium
小鼠肿瘤细胞分离液 1.070200mL规格YMAgar
M17肉汤 100(g) incubation media M17肉汤 100(g)
头孢他啶 Ceftazidime 3毫克/支×5 添加于100mlHB4155
厌氧菌琼脂250用于厌氧菌分离培养incubationmedia厌氧菌琼脂250用于厌氧菌分离培养
3%氯赖氨酸脱羧酶试验培养基 20支 用于副溶血性弧菌赖氨酸脱羧酶试验
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文献和实验。 Percoll浓度(％) 70 60 50 40 30 20 比重g／ml 1.090 1.077 1.067 1.056 1.043 1.031 2. 不连续密度梯度Percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润，除去多余血清，这种预处理可使逐层叠加的Percoll液
试剂 1. 小牛血清 2. Percoll细胞分离液 3. 8.5％NaCl 4. 1.5MPBS 实验设备 1. 高速冷冻离心机(3K-30) 2. 4℃、-20℃冰箱 3. 长针头注射器 4. 1.5mL和10mL离心管 实验材料 PBMC细胞 实验步骤 1. 不同
从单个小鼠肿瘤样本中分选高纯度、高活性 TIL 细胞亚群的完整工作流程
封闭的无污染的一次性分选盒中进行，分选过程中不会有气溶胶的产生。因此既可保障不同的分选过程不会发生样品间交叉污染，又可以最大限度的保障实验室操作人员的安全。 实验结果及分析 1. 组织解离器和磁珠分选仪可以为细胞分选提供高纯度和高活力的 TIL 细胞。 小鼠肿瘤组织经分离试剂进行单细胞分离和磁珠分选仪的预富集，可提供纯度高达 81.5% TIL 细胞样本用于随后的细胞分选 (见图 A，经特异性免疫磁性预富集后的 CD45+ 肿瘤浸润性淋巴细胞 , TILs)。 2. MACSQuant® Tyto® 细胞
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