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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 库存:
20-60
- 供应商:
上海抚生
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
CHIA
- 规格:
0.1ml
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文献和实验和昆虫细胞表达系统,尤其是分泌蛋白的纯化中,His-tag系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基pH通常为酸性,会干扰His-标签蛋白与IMAC纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基,则通常含有氨基酸会竞争His-标签的结合位点,如组氨酸,谷氨酰胺或精氨酸。 Strep-tag®系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理,酸性pH和有力的氨基酸不会影响Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合(前文也曾提到,此系统的耐受pH范围为4-10)。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意
十分重要,因其不仅影响蛋白的表达,而且也影响随后的纯化过程。除耐受缓冲液条件有限外,当选择宿主表达系统时,His-tag 也有一些局限。 His-tag 大肠杆菌表达系统中较为有利,但实际情况下对于酵母,哺乳动物和昆虫细胞表达系统,尤其是分泌蛋白的纯化中,His-tag 系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基 pH 通常为酸性,会干扰 His-标签蛋白与 IMAC 纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基,则通常含有氨基酸会竞争 His-标签的结合位点,如组氨酸,谷氨酰胺或精氨酸。 Strep
哺乳动物表达系统是适用于生成具有天然结构和活性的哺乳动物蛋白的首选表达平台,可以实现最高水平的翻译后加工,使蛋白质获得最佳功能活性,适合在最类似生理学的环境中研究特定蛋白质的功能。它常用于抗体和治疗性蛋白质以及人类功能细胞分析的蛋白质表达。 和稳定表达相比,哺乳动物瞬时表达系统可实现灵活且快速的蛋白质生产,可以在 1-2 周内生成大量蛋白质,适用于人或其他哺乳动物蛋白的表达,和大肠杆菌、酵母或昆虫细胞等宿主表达系统相比,可实现更天然的折叠和翻译后修饰——包括糖基化(图 1)。 图 1、哺乳动物
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