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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
上海雅吉生物科技有限公司
- 检测范围:
6个月
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
仅供科研
- 适应物种:
人、大小鼠等
- 样本:
组织/血清/血浆/尿液
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1600.0 |
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)Elisa试剂盒使用过程总常见问题汇总:
一,ELSIA实验中结果颜色浅、灵敏度偏低的原因
1. 试剂盒在运输、保存期间放置的温度过高,时间过长,造成抗原、抗体效价下降,酶的活力降低。
2. 试剂盒已经超出保存的有效期,抗原抗体效价下降,酶的活性降低。
3.移液取样不足,移液时抽吸、排放太快,移液嘴内壁挂液太多或者内壁不清洁。造成加样量不足。
4.孵育温度偏低,或多块反应板重叠放置造成孔内的实际温度偏低,使抗原、抗体复合物形成过少。
5.保温时间不足,抗原、抗体反应不完全。
6.显色剂加入量不足。
7.显色液A,B比例不对。
8.洗涤时冲击力过大,洗涤液浸泡时间太长,洗涤次数增加,导致已经形成的抗原、抗体复合物洗脱。
9. 底物反应的温度不够、时间不足。
二.ELSIA实验中结果出现白板、阳性对照不显示的原因
1.洗涤液配制有误。
2.终止液误作为浓缩洗涤液或者酶结合物稀释使用。
3.漏加酶结合物,误加酶结合物或者酶标二抗的实验顺序错误。
4.终止液当作缓冲溶液使用。
5.配制溶液中残留了灭活酶活力的物质。
6.底物液未加入OPD或者TMB.
7.运输、存储不当、导致酶活力丧失。
8.底物液中未加入过氧化氢或放置过久过氧化氢失效。
三.ELSIA实验中结果全部显色的原因
1.酶结合物的浓度过大。
2.孵育温度偏高,底物显色时间过长。
3. 洗涤不充分,样品有其他成分残留或者酶结合物残留。
4.底物配制时间过久,底物受光照射时间较长或污染。
5.整批样品放置时间过长被污染或生长细菌。
6.移液嘴重复使用时,未清洗干净或者消毒不彻底。
7.配制溶液的水质有问题。
四.ELSIA实验中结果阴性、阳性对照显色差距较小的原因
1.稀释不准、加样量不准。
2. 加样时各孔均被污染。
3.底物不新鲜,配制时间过长或被污染。
4.试剂效价下降或超过了试剂的有效使用期。
5. 配制溶液的水质有问题。
五.试剂盒实验结果重复性不好的原因
1.样品加入量多少不一,加样时间又长有短。
2.样品加入后未充分混合均匀。
3. 移液加样器加样量不一致。
4.酶标仪滤光片不对。
5.操作过程中个别反应孔中液体外溅。
6.不同批号试剂混用。
7. 瓶盖交叉使用。
8. 孵育条件和保温时间不一致。
9. 显色时间和条件不一致
10.边缘效益,导致周边孔(尤其是四个角)较中央孔显色深。
11.将酶结合物或底物溶液加在孔壁上,并有残留。
12.酶结合物未充分混匀就加入反应孔中。
13.洗涤条件不一致。
14.多加或少加了酶标记物、底物。
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友情提醒:人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)Elisa试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染!
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一、ELISA的原理 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中
1. 催化特点 ① 高效性 ② 专一性 键专一、基团专一、绝对或几乎绝对专一 ③ 可调节性 酶浓度调节、激素调节、共价修饰调节、限制性蛋白酶的水解作用与酶活调节、抑制剂的调节、反馈调节、金属离子和其他小分子化合物的调节。 2. 影响酶活因素 ①. 酶活测定方式 测定酶活,必须了解酶催化反应总的反应式,而且分析程序必须能够测定底物的消失或产物的生产。还需考虑辅助因子、酶的最适pH值和最适温度。 ②. 酶联测定法 过氧化物酶和它的共底物或辅酶必须过量,使酶联测定不属于限速步骤。 ③ 酶
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