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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
25
- 英文名：
菌落 PCR 试剂盒 2.0
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50 次
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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菌落 PCR 试剂盒 2.050 次费用详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
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柱式 DNA 胶回收试剂盒100 次 硫酸卡那霉素干粉1g
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胶回收及 PCR 片段纯化两用试剂盒100 次 化蛋白富集试剂盒10 次
一管式 DNA 胶回收试剂盒30 次 化蛋白纯化试剂盒50 次
一管式 DNA 胶回收试剂盒100 次 10 次
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ConA 糖蛋白分离试剂盒10 次 RNase-free 盐酸胍溶液 ,8M100mL
WGA 糖蛋白分离试剂盒10 次 RNase-free 水1mL
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包涵体中量纯化试剂盒5次 RNase-free 氯化溶液 ,10M100mL
侧孢短芽孢杆菌 藤黄微球菌
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粉褶侧耳、粉红侧耳 恶臭醋酸杆菌混浊变种
单增李斯特菌 屎肠球菌(屎链球菌)
胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm/25cm2 白色念珠菌ATCC90029冻干粉
纺缍形赖酸芽孢杆菌 健强地霉
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链格孢 黄色短杆菌 产谷酸
露湿漆斑菌 产短杆菌
苏云金芽胞杆菌九州亚种Bacillusthuringiensissubsp.kyushuensis 沙保罗葡萄糖琼脂表面培养基60mm/25cm2
菌落 PCR 试剂盒 2.050 次费用花生根瘤菌 酿酒酵母 酿造果酒(水蜜桃)。
干酪乳杆菌 酿酒酵母 生产面包
大肠埃希菌ATCC35218冻干粉 酿酒酵母 酿造果酒（白梨）
鸡纵 解肝磷脂土地杆菌
阴沟肠杆菌 尘埃芽孢杆菌
操作步骤:
1. 菌落 PCR 试剂盒 2.050 次费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验和Topo平端的一样，含ccdB基因，所以同样可降低菌落背景，易于筛选。 表10 PCR 克隆 试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method
Blunt PCR克隆乃利用传统T4连接酶方法，但载体和Topo平端的一样，含ccdB基因，所以同样可降低菌落背景，易于筛选。 表10 PCR克隆试剂盒的选择 Amplification Enzyme Application of Cloned PCR Product Ligation Method Product
中抽提获得。试剂:PCR 试剂盒购自上海生工生物工程公司。引物:扩增人CD137 胞膜外区的引物P1 :5’CCC AAG CTT ATG GGA AAC AGC TGT TAC 3’, P2 :5’AAA CTG CAG CTG CGG AGA GTG TCC TG 3’;扩增hIgG1Fc 的引物P3 : 5’AAA CTG CAG TCT TGT GAC AAA ACT CAC 3’, P4 : 5’CCC GAA TTC TCA TTT ACC CGG AGA CAG 3’,扩增 HBV DNA
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