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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
66
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1ml×6
特别提示:包括SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液2×(变性)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液2×(变性)
产品货号:ZN1875
产品规格:1ml×6
产品保存:-20℃保存,一年有效
产品说明:SDS-PAGE Tricine 蛋白上样缓冲液 2×,是一种以考马斯亮蓝 G-250 为染料的2倍浓液的蛋白上样缓冲液,试剂中含有 SDS,甘油,考马斯亮蓝 G-250,Tris-HCL缓冲液等,可用于常规的多肽和小蛋白的SDS-PAGE 变性蛋白样品上样。
使用方法:
1.按照1体积蛋白样品加入1体积蛋白上样缓冲液即1:1的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(2×)。经 100℃水浴变性3-5分钟后即可上样,电泳。
2.通常电泳到当考马斯亮蓝G-250染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
注意事项:
1.刚从冷冻保存中拿出来平衡至室温溶解后,可能会出现 SDS的沉淀,建议可用温水水浴中使其溶解。
2.为了您的安全和健康,请戴一次性手套在通风厨内操作。
除了SDS-PAGE Tricine蛋白上样缓冲液2×(变性),,我公司还供应以下相关产品:
名称:Western一抗稀释液(WB一抗稀释液)
货号:YT066
规格:100ml
本品可以用于Western时一抗的稀释和配制。使用本Western一抗稀释液稀释和配制的一抗可以在4℃保存和使用不少于六个月,可以反复多次用于Western,节约您宝贵的抗体。按照每个一抗稀释10毫升计算,一个包装的Western一抗稀释液可以稀释10个或10次一抗。
注意事项:为了能使抗体可以反复多次使用,建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应,以减缓一抗的衰减速度。
储存条件:4℃,有效期一年。
名称:蛋白印迹膜再生液
货号:ZN1923
规格:100ml
产品保存:4℃保存,一年有效
产品说明:
蛋白印迹膜再生液,用于免疫印迹中转移了蛋白后膜的重复利用。在免疫印迹中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测表达量相对稳定的内参蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用蛋白印迹膜再生液中特殊成份解离一抗二抗与印迹膜上抗原的结合从而去除一抗二抗,即可非常方便地重新利用同一张膜检测其它蛋白。与重新跑一个 SDS-PAGE 胶比较,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
产品特点:
1.不含有常用的beta-巯基乙醇,室温下使用,可对同一膜进行 5次以上的免疫印迹检测.
2.独有的配方,效力强,对蛋白作用温和。
使用方法:
1.用 TBS-T 将膜洗10分钟×3次,将膜充分浸泡于适当体积再生液中,摇床震荡室温孵育30-60分钟(孵育时间视具体情况而定,表达量高的蛋白可适当延长时间,表达量低的蛋白可减少时间)。
2.用镊子取出膜,用 TBS-T洗涤缓冲液快速淋洗膜一次,然后洗膜 5-10分钟。
3.此时膜上结合的抗体己被洗脱,可重新封闭,进行下一轮抗体孵育。
注意事项:
1.刚从冷冻保存中拿出来会出现 SDS的沉淀,建议温水溶解再使用。
2.建议先检测表达量较低的目的蛋白,用再生液处理后检测表达量高的蛋白。
3.本品适用于 NC 膜和 PVDF 膜,推荐使用 PVDF 膜,效果更佳。
4.不推荐用于 BSA 封闭的印迹膜以及 DAB,NBT/BCIP 显色的印迹膜。
5.请佩戴手套操作。
名称:免疫荧光试剂盒(小鼠源IgG型一抗)(Cy3)
货号:ZN1859
规格:100T|200T|500T
本试剂盒采用SABC系统,是专为免疫化学而设计的,用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-Cy3代表了新一代的免疫荧光方法。Cy3比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。Cy3在554nm激化,在568-574nm发射荧光,呈鲜红色。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 正常浓缩山羊血清(稀释比1:10) | 1ml/2ml/5ml |
| 生物素标记羊抗小鼠IgG(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
| SABC- Cy3(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
另附有三个滴瓶可供稀释试剂用
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭:滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10),室温 20 分钟,甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(小鼠IgG),37℃孵育 1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记羊抗小鼠IgG(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC-Cy3(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验- 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-polyac1ylarnide gelelectrophoresis, SDS-PAGE)、Native-PAGE 等,比较常用的是前者。SDS-PAGE 中的蛋白需先变性展开再进行研究,主要是根据蛋白的质量在凝胶中进行分离,特别适用于评估蛋白质量的变化。与之相反的便是 Native-PAGE:其实验原理是蛋白质保留其原生的折叠状态,并根据其净电荷、质量、形状在凝胶中分离,如体积小、结构紧凑的蛋白会迁移更快,可用于评估蛋白的化学修饰。嗦,接下来我主要 bia 下常用
【原创】Tricine SDS-PAGE凝胶配方(16.5%)
战友是用不上了,但后来的战友也许能用上,我也欣慰啦^_^一、Tricine SDS-PAGE药品配方如下1.正极电泳缓冲液(1x):12.19gTris 先溶于400ml双蒸水1mol/L的HCL调至PH8.9,再定容至500ml。2.负极电泳缓冲液(1x):6.055g Tris ,8.958g Tricine(三羟甲基甘氨酸),5.0g SDS ,将这三种药品溶于400ml双蒸水中,1mol/L的HCL滴定到PH8.45(这步大家注意了,我实际试验操作发现没调PH值前,PH值实际为8.35
一、原理及目的(略)二、试剂 1、30%丙烯酰胺贮存液:29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于100ml热水中,验证其pH值不大于7.0。置棕色瓶中,4℃保存。2、1.5mol/L Tris(pH8.8)溶液3、10% SDS溶液4、10%过硫酸铵:新鲜配制5、TEMED溶液:4℃保存6、1.0 mol/L Tris(pH6.8)溶液7、2×样品溶解液:2%SDS,5%巯基乙醇,10%甘油,0.02%溴酚蓝,0.01mol/L Tris-HCl(pH8.0)缓冲液。8、5×Tris
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