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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
JM109 化学感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
0.1mL×10
JM109 化学感受态细胞0.1mL×10说明书详细介绍：
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是JM109 化学感受态细胞0.1mL×10说明书的相关产品：
EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol 哺乳动物种属鉴定 PCR Mix100 次
Oligo 快速复性液，10×1mL 哺乳动物蛋白酶抑制剂1mL
裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次 博莱霉素溶液 ,10mg/mL1mL
裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次 剥离硅烷50mL
酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次 玻璃珠法柱式真菌 DNAout50 次
粪便 DNAout30 次 一管式病毒 DNAout200 次
粪便 DNAout100 次 一管式 DNA 胶回收试剂盒30 次
柱式粪便 DNAout50 次 一管式 DNA 胶回收试剂盒100 次
凋亡 DNAout24 次 一步式细菌 DNAout50 次
柱式凋亡 DNAout50 次 一步式广谱 DNAout10mL
一步式 PAGE 染液10 次 GTP 溶液，2.5mM2mL
绿如蓝蛋白染液250 次 GTP 溶液，100mM0.25mL
超快蛋白银染试剂盒1000mL GST 固定试剂盒1套
可逆性铜染试剂盒1套 GSH( 抗氧化剂 )1g
可逆性锌染试剂盒1套 Golgi-Tracker Red( 高尔基体红色荧光探针 )1mg
白色念珠菌ATCC90028冻干粉 白腐菌
大毛霉 葡酒色被孢霉
隐甲藻 食神鞘氨醇杆菌
青色链霉菌 苜蓿根瘤菌
洋葱伯克霍尔德氏菌 苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae
地霉属 雪白根霉
戊糖乳杆菌 丝球毛霉
光滑念珠菌KTCC0001冻干粉 巧克力微杆菌
头状丝孢酵母 卷枝毛霉
抗辐射链霉菌 沙保罗琼脂平板70mm
JM109 化学感受态细胞0.1mL×10说明书光孢短柄帚霉 中华根霉
尿素八叠球菌 灭酵母
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种Bacillusthuringiensissubsp.galleriae 迟缓芽孢杆菌
假芝 匍枝根霉
屎肠球菌(屎链球菌) 伯顿毕赤酵母
操作步骤:
1. JM109 化学感受态细胞0.1mL×10说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验） 3：BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr 4：JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
） 3：BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr 4：JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
【交流】转载：JM109，DH5a，BL21这些感受态有何区别
就能被上述酶切割。 E.coli JM110 要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如JM110 如果由JM110或 SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化. 各种感受态细胞的区别 用途 特征 Xl1-Blue菌株 基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK
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