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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
φX174RF Ⅰ DNA
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
30μg
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是φX174RF Ⅰ DNA30μg规格的相关产品:
dATP 溶液,100mM0.5mL 高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5100 次
dTTP 溶液,2.5mM2mL 高 GC DNA 清除剂,PCR 级1.5mL
dTTP 溶液,100mM0.5mL 杆菌肽溶液 ,100mg/mL1mL
dGTP 溶液,2.5mM2mL 肝细胞生长因子5mL
dGTP 溶液,100mM0.5mL 钙蛋白酶抑制剂Ⅱ溶液,10mg/mL10mL
RNase-free PVP K30 溶液 ,20%100mL 植物种属鉴定 PCR Mix 3100 次
RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%100mL 植物种属鉴定 PCR Mix 2100 次
RNase-free SDS 溶液 ,10%100mL 植物种属鉴定 PCR Mix 11100 次
RNase-free 乙酸 ,3M,pH 5.2100mL 植物种属鉴定 PCR Mix 1100 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5100mL 植物种
脂蛋白 PAGE 染液1套 Glucosamine( 胰岛素抵抗诱导剂 )5g
糖蛋白 PAGE 染液1套 Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制剂 )25mg
质谱兼容型蛋白银染试剂盒10 次 G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD
银染清除剂30 次 G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD
成骨细胞生长因子5mL Fura-2,五铵盐1mg
巴西毛壳 戴尔根霉
产黄纤维单胞菌 肺炎克雷伯菌冻干粉
蜜粘褶菌=革裥菌 乳酸乳球菌乳酸亚种
赭曲霉 苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki
苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis 两型孢毛霉
大豆慢生根瘤菌 荚膜红细菌
长赤细菌 土壤伯克氏菌
寄生曲霉 多形鲁氏酵母
微黄八叠球菌 地衣芽孢杆菌
灰色链霉菌 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)70mm
φX174RF Ⅰ DNA30μg规格改良马丁琼脂培养基90mm 宇佐美曲霉
哈茨木霉 威尼斯不动杆菌
海藻希瓦氏菌 淡天蓝色链霉菌
施氏汉逊酵母 栗酒裂殖酵母
变异链球菌 海洋海栖菌
操作步骤:
1. φX174RF Ⅰ DNA30μg规格匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
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文献和实验分别取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl ,混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。(稀释后各孔加样量都为 50μl ,浓度分别为 30μg /L , 20μg /L , 10μg /L , 5μg /L , 2.5 μg/L )。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、 待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40 μ l ,然后再加待测样品 10 μ l (样品最终
。 1.2 药物代谢 药物代谢,又称药物的生物转化(biotransformation),是指药物经过体内吸收、分布之后,在药酶的作用下经历化学结构变化的过程,是药物从体内消除的主要方式之一。药物在体内的生物转化,分为Ⅰ相代谢反应和Ⅱ相代谢反应。 肝脏是药物代谢的重要器官,是机体进行生物转化的主要场所,含有参与药物代谢Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢的各种酶。在肝脏中,参与药物代谢的Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶中以P450酶最为重要,它是一种以铁卟啉为辅基的蛋白质。P450酶存在明显的种属、性别和年龄的差异,其中以种属
人胃蛋白酶原Ⅰ(PG Ⅰ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中 胃蛋白酶原Ⅰ(PG Ⅰ) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 胃蛋白酶 原Ⅰ (P G Ⅰ ) 水平。用纯化的人 胃蛋白酶 原Ⅰ (P G Ⅰ ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 胃蛋白酶 原
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