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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
上海雅吉生物科技有限公司
- 检测范围:
6个月
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
仅供科研
- 适应物种:
人、大小鼠等
- 样本:
组织/血清/血浆/尿液
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1000.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1600.0 |
选择试剂
选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
加样
可能原因
1.血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2.手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
3.加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法
1.标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2.加样后及时放入孵箱。
3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4.如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5.标本较多时,请分批操作。
人多巴色素异构酶(DT)Elisa试剂盒孵育
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现人多巴色素异构酶(DT)Elisa试剂盒标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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文献和实验缺点 1 放射性的东西可否不用 2 要加接头,还要磷酸化 clontech 的: 第二链的合成有PCR技术,是否会引起碱基突变 Novagen的: 优点 1 提供两种primer,oligo dT & random primer,可根据目的进行选择; 2 提供EcoRⅠ/HindⅢ酶切位点,便于定向克隆; 缺点 不知什么原因第二链合成效率不高
)9 ]在RNA 模板上没有特异性结合位点,所有RNA 都可以做为第一链cDNA合成的模板; (2) Oligo(dT)18 与poly(A)+ mRNA 的3’-末端互补,只有poly(A)+ mRNA 可作为cDNA合成的模板; (3) 采用序列特异性引物以其结合位点为起始位点。 2.当第一链cDNA合成条件与PCR的条件能够兼容时,则本试剂盒的第一链cDNA合成产物可直接加入PCR反应混合物中进行反应。 3.第一链cDNA合成产物同样可经过处理后作为第二链合成
-PCR技术的改进:改进之一是利用锁定引物((lock docking primer)合成第一链cDNA,即在oligo(dT)引物的3'端引入两个简并的核苷酸【5'-Oligo(dT)16_30MN-3', M=A/G/C;N=A/G/C/T】,使引物定位在poly(A)尾的起始点,从而消除了在合成第一条cDNA链时oligo(dT)与poly(A)尾的任何部位的结合所带来的影响;改进之二是在5‘端加尾时,采用poly(C),而不是poly(A);改进之三是采用RNase H一莫洛尼氏鼠白血.病毒
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