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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
143B TK
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
干冰
- 规格:
详见说明书
我司客户的消费行为大体分为二个阶段:
是量的消费阶段
第二是质的消费阶段
143B TK(人胸腺激酶缺陷细胞)复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
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文献和实验基因机能营救 function rescue by gene
指对因某基因产生变异而引起异常的细胞,人为地引入具有正常机能的基因,恢复其表现形质而言。例如使在胸腺嘧啶脱氧核苷激酶基因缺陷( tK- )的小白鼠 L细胞,吸收疱疹病毒分离出的胸苷激酶基因与磷酸钙凝胶的混合物,表现形质转换成 tK+ ,此时一般认为引入的基因是在细胞中加合起来的,而不是用正常基因靠遗传的重组来代换有缺陷的基因。
抗体或者产生抗体的某种链,医学教育|网搜集整理但不能分泌;②是次黄嘌呤鸟嘌呤核苷酸转移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷型。因为这种缺陷型的瘤细胞正常的核酸合成途径被氨基喋吟(aminopterin)阻断后,由于缺失这些酶,即使补充它的底物次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T),核酸合成的旁路也不能起到救援的作用,结果导致瘤细胞死亡。而杂交瘤细胞因带有B细胞的全套基因,在HAT存在的条件下借助于HGPRT和TK的作用通过替代的核酸合成途径能正常合成DNA和RNA.所以杂交瘤能正常地生长繁殖而被选择
NIH3T3细胞中本身是没有TK的,1981年Scolnick利用lambda载体把胸腺嘧啶激酶(TK)转入NIH3T3细胞,构建成NIH3T3 TK细胞,所以细胞分为NIH3T3 TK+和NIH3T3 TK-两种细胞,在Scolnick认为NIH3T3就是NIH3T3(TK-)。 他做转染细胞的基础是基于1969年Todaro的实验。 具体内容参看建株文献:J Virol.1981 September; 39(3): 935–944
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