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- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
IM-9
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
干冰
- 规格:
详见说明书
我司客户的消费行为大体分为二个阶段:
是量的消费阶段
第二是质的消费阶段
IM-9(人外周血B淋巴细胞)复苏
1. 把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。
2. 把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。
3. 把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。
4. 标细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。
5. 3天换一次培养基。
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文献和实验。如果直接倒掉,离心管内会有残留裂解液,后续加入100 μL PBS重悬细胞时,可能不能完全稀释裂解液,导致红细胞裂解过度。 6. 细胞沉淀重悬,可用枪轻轻吹打,或者用转速小的涡旋仪涡旋。 7. 人血样本建议染CD45,有利于后续数据分析时圈门。 8. 处理人血样本时,推荐设置只染CD45的单染管低速上机用来设置阈值,观察细胞量,圈淋巴细胞群。 9. 人外周血中主要含T淋巴细胞,B淋巴细胞的量较少。如果使用病人的血液样本,B淋巴细胞的量可能更少,因此B淋巴细胞的检测不推荐使用过夜的样本,过夜样本易导致
1. 蔗聚糖――泛影葡胺可使红细胞聚集成串后沉降,及粒细胞沉降,最多用于人外周血单细胞分离,常用400×g,15-30分钟,水平离心; 2. 可用膜滤器除菌,也可用加热高压灭菌; 3. 离心时保持20度效果较为重要,温度过高或过低均影响分离效果; 4. 可用于人外周血、骨髓等分离单个核细胞、E花环、EA细胞分离、肿瘤细胞分离、TIL等分离及死细胞去除等。 二. Percoll分层溶液
恶性肿瘤病人外周血免疫指标的流式细胞仪检测及免疫治疗前后免疫功能变化的研究
恶性肿瘤的发生、发展与机体免疫系统密切相关。运用流式细胞术的方法,检测T淋巴细胞表面抗原(CD3、CD4、CD8),B淋巴细胞表面抗原(CD19、CD20),NK细胞表面抗原(CD16+56)在恶性肿瘤病人外周血中的表达,并检测活化T、B、NK淋巴细胞的免疫指标(CD3/HLA-DR、CD3/CD25)的变化,探讨淋巴细胞在肿瘤中的表达状况及其意义,并进一步分析恶性肿瘤病人免疫治疗前后的免疫功能改变,以致使我们更深一层认识肿瘤在细胞水平的免疫功能。 1、资料与方法 1.1 研究对象
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