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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
液态或冻干粉
- 保存条件:
低温
- 标记物:
FITC标记抗体
- 供应商:
圻明生物
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
Anti-VGF/FITC
规格:100ul
浓度:1mg/ml
研究领域:免疫学 神经生物学 激酶和磷酸酶 表观遗传学
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep,
相关标记抗体:辣根过氧化物酶标记抗体,生物素标记抗体,胶体金标记抗体,红色罗丹明(RBITC)标记抗体,橙黄色PE标记抗体,绿色荧光素(FITC)标记抗体等。
圻明生物公司所售产品仅供科研试验。
FITC标记的神经内分泌调节肽VGF抗体用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。
作为标记的荧光素应符合以下要求:
①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。
②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。
③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明。
④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性质。
⑤标记方法简单、安全无毒。
⑥与蛋白质的结合物稳定,易于保存。
生长因子和激素(Growth Factor and Hormones) 血管内皮细胞生长因子(VEGF)是一种特异作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子,它能引起血管通透性增加,引起细胞外基质成分改变,诱导血管形成。在炎症、创伤愈合、心脏缺血、动脉粥样硬化、糖尿病性视网膜病变及肿瘤形成等与血管生成和病变有关的诸多病理过程中起重要作用,VEGF与血管生成有关,从而也与肿瘤生长也有很大关系,近年来受到很多关注。
FITC标记的神经内分泌调节肽VGF抗体免疫印迹操作-转膜
1).将凝胶玻璃板置于盛有电泳转移缓冲液的容器中,浸泡15 20min.。
2).带上手套,裁剪好滤纸(Whatman, 3MM CHR)和电转膜,滤纸和膜大小为83mmX 75mm,尽量避免污染滤纸和膜,将裁减好的滤纸和膜浸泡与电泳转移缓冲液中,驱除留于膜上的气泡。
3).打开转移盒并放置浅盘中,用转移缓冲液将海绵垫完全浸透后将其放在转移盒壁上,海绵上再放置- -张浸湿的 Whatman, 3MM滤纸。
4).小心将凝胶放置于滤纸上,避免气泡(用转移缓冲液润湿并戴手套以转移缓冲液润湿胶面,小心将电转膜放在胶面上,从凝胶的一边开始轻轻放下可避免气泡,注意- -定要戴手套或镊子接触膜)。
5).用去离子水清洗缓冲液槽,在缓冲液槽中放入搅拌子,将另一块海绵用转移缓冲液浸透后放在凝胶膜“三明治”上,关上转移盒并插入转移槽。
6).将冰盒装入缓冲液槽,注满4'C预冷的转移缓冲液。
7).将整个装置放在磁力搅拌器上并开始搅拌,连接好转移电极恒流300mA转移70min。
8).电转完毕后,将电转膜置于5%的脱脂奶粉(PBS 配制)中封闭,37*C2 小时或4C过夜。
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文献和实验免疫- 内分泌- 神经系统的相互作用和调节 免疫系统行使功能时,往往与其他系统发生相互作用,特别是神经和内分泌系统。众所周知,紧张和精神压力可加速免疫相关疾病的进程,内分泌失调也制约着疾病的发生和发展。除了针对神经内分泌系统特定成分可产生抗体应答,此类相互作用一般以固有免疫为主。 神经递质、内分泌激素、受体、免疫细胞及免疫分子之间存在千丝万缕的联系,其中可以构成调节性网络的,主要包括以下方面。
中依次加入 VGF 神经生长因子诱导蛋白 (VGF) ,再与 HRP 标记的 VGF 神经生长因子诱导蛋白 (VGF) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 VGF 神经生长因子诱导蛋白 (VGF) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠 VGF 神经生长因子诱导蛋白 (VGF) 浓度。
Tip 1:补偿控制样品必须只染一种颜色 当细胞群同时向两个通道发射荧光时,可能是由于两个原因: 细胞群表达一种 Marker,该标记物被荧光染料偶联的抗体染色,在第二个通道中检测到荧光染料的荧光溢出。 细胞群表达两种 Markers,这些标记物被两种不同荧光染料染色,发射出的荧光到两个通道中。为了在补偿期间排除双阳性细胞的干扰,调节补偿应仅用单一染料染色。 Tip 2:样本中必须包含中位数比较的阴性和阳性细胞群 要正确调节补偿,必须比较溢出通道中阴性和阳性细胞的中位数荧
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