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- 2025年07月10日
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上海机纯实业有限公司
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常温，避光
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详见说明书
品牌： gelatins
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方法概述：
分离混合血液白细胞早期的方法，总是伴随红细胞聚集，只轻微影响白细胞。通过离心，红细胞密度增加聚集，同时可以从离心管上部收集白细胞。
Byum提出了一种更方便，通过使用 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在甲泛影钠溶液中分层，低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞，和单个核细胞（淋巴细胞）和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力，修订了Byum方法，MP生物医学公司生产的LSM，方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
使用说明：
以下的操作步骤是初由Byum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液；这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM（室温）于15ml离心管中，在血液和LSM中形成一个明显的分层。人CIK细胞无血清培养基不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟，离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞，如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中，室温离心10分钟，离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻，例如160 - 260 x g（去除LSM和降低血小板的百分比）。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞，用适当的培养基重悬细胞。
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文献和实验【摘要】 目的 比较无血清培养基（AIMV）与完全培养基（CM）体外诱导扩增CIK细胞及CIK细胞分泌细胞因子水平。方法 分别用AIMV及完全培养基加入4种细胞因子(IFNγ、IL2、IL1及OKT3)将脐带血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞，比较细胞的增殖能力、细胞表型及分泌细胞因子水平。结果 与完全培养基比较，无血清培养基培养的CIK细胞增殖高峰较晚(14～17天),但增殖倍数高
什么是CIK？ CIK，即cytokine induced killer的简称，中文称之为“细胞因子诱导性杀伤细胞”。 CIK是一种高效杀伤活性的异质性细胞群，是一种新型高效的具有广谱杀肿瘤、病毒活力的MHC非限制性的免疫效应细胞，具有增发殖速度快、显著杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞，清除病毒的活性。CIK细胞疗法是过程性免疫疗法之一，是目前抗肿瘤，抗乙肝、丙肝治疗最新、最好的免疫
【求助】请教！我用无血清培养基养的胃癌原代细胞，为什么会出现这种小颗粒？
暮色英雄 我是用无血清NB培养基+EGF+bFGF+B27+p/s双抗的培养基培养的胃癌原代细胞，培养基已经用0.22μm过滤器过滤除菌，但是培养细胞之后出现很多小颗粒，不知道是什么东西，这照片是昨天照的，今天再观察的时候这些小颗粒已经长满了，我师姐帮我看了说是污染，然后我把细胞倒掉了，但是她也不知道这是什么污染。希望各位大侠能帮小弟看看这到底是不是污染，是什么东西？谢谢了 这是20x镜拍
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