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PCR 克隆试剂盒(无感受态细胞)

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月14日
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    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -80℃

    • 规格

      20次

    特别提示:包括PCR 克隆试剂盒(无感受态细胞)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:PCR 克隆试剂盒(无感受态细胞)
    产品货号:SV0975
    产品规格:20次

    特性:
    单克隆所有类型的 PCR 产物更为简单,包括平末端和 TA 末端
    克隆速度快,连接仅需 5 分钟
    筛选简单,几乎没有克隆背景,不需要蓝白斑筛选
    无需纯化步骤,节约时间
    两侧的限制性内切酶酶切位点方便亚克隆,包含两种单酶切选择
    概述:
    我公司PCR试剂盒提供:优化的 2X 克隆预混液(其中配有独特的连接增强剂)和线性载体。该线性载体利用zuì新技术抑制背景菌落生长,使背景值降为zuì低。本试剂盒能简单、快速克隆各种 PCR 产物。具有校读功能的聚合酶产生平末端扩增子(如:Q5 或者 Phusion),无校对功能的聚合酶产生单碱基突出末端的扩增子(如Taq、OneTaq、LongAmp Taq)。2X 克隆预混液中包含有末端修复成份,可在连接反应步骤前进行末端平齐化,因此,无论扩增子是何种末端都能完成有效连接。此外,使用本试剂盒,PCR 产物无需纯化,PCR 引物也无需经过 5´ -磷酸基修饰。
    ●提供下游菌落 PCR 或测序引物
    ●试剂盒包含 1 kb 扩增子对照和线性载体及一次用量的大肠杆菌感受态细胞
    ●比其它商业化产品保质期长(12 个月)
    PCR 克隆试剂盒包含:
    – 克隆预混液
    – 线性化 pMiniT™ 载体
    – 对照扩增子
    – 克隆检测正向引物
    – 克隆检测反向引物
    – 我公司10-beta E. coli 感受态细胞(克隆级)(仅在 E1202 提供)
    质保声明:
    我公司PCR 克隆试剂盒经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。

    除了PCR 克隆试剂盒(无感受态细胞),,我公司还供应以下相关产品:



    名称:无毒RNA酶清除剂
    货号:WE0222
    规格:100ml
      本产品是一种高效的RNase灭活清洁剂。它含有多种成分,能高效灭活玻璃、塑料表面的 RNase污染,保障工作环境的清洁。本产品效力和速度远远高于常用的DEPC,可在5分钟内将固体表面的多达100μg的RNase彻底灭活。经RNase清除剂清洗过的容器、实验台面、枪头、电泳槽等,可确保不含RNase污染。

    产品特点
    1、无毒的RNase灭活剂;
    2、可代替DEPC,去除固体表面的RNase。

    实验前准备及重要注意事项
    1、使用前请检查本产品是否出现沉淀,如有沉淀,请将溶液置于 37℃水浴重新溶解。
    2、RNase 清除剂可直接使用,请勿稀释,稀释后会降低灭活效力。
    3、操作人员在使用RNase 清除剂过程中要戴手套,避免皮肤直接接触。使用喷洒瓶时请戴口罩并在通风橱等通风环境下 进行,以防对人产生刺激。
    4、请勿将RNase 清除剂用在易腐蚀的金属表面。

    使用方法

    一、用RNase清除剂处理工作平台
    直接将RNase清除剂喷于台面,普通吸水纸擦净,用水冲洗干净后用吸水纸擦净,晾干。

    二、用RNase清除剂处理实验仪器
    用浸有RNase清除剂吸水纸擦拭仪器表面,用水冲洗干净后用吸水纸擦干。 一些小的仪器部分可直接浸泡在RNase清除剂溶液中,用水冲洗干净后用吸水纸擦干。

    三、用RNase清除剂处理玻璃和塑料器皿
    将器皿浸泡在RNase清除剂溶液中或将RNase清除剂溶液喷洒在器皿表面,再用蒸馏水冲洗两次,倒立晾干后备用。如处理离心管可直接将RNase清除剂溶液加入离心管中,进行涡旋震荡,离心后去除RNase清除剂溶液,蒸馏水 冲洗两次,晾干后备用。

    四、用RNase清除剂处理移液枪
    根据生产厂家的使用手册卸下移液枪的前端, 留下接口塞和圈套后将其浸泡在RNase清除剂中,再用水冲洗干净, 晾干,将移液枪按使用手册组装好。

    储存条件:室温(15~30℃)

    名称:HiSribe T7 高效 RNA 合成试剂盒
    货号:SV1344
    规格:50次
    特性:
    合成长链或短链 RNA 转录产物
    掺入修饰的核苷酸
    掺入标记的核苷酸
    利用帽类似物合成带帽 RNA
    合成高比活或低比活放射性标记的探针
    概述:
    HiSribe T7 高效 RNA 合成试剂盒利用 T7 RNA 聚合酶进行高效灵活的体外转录,该试剂盒可转录合成各种类型 RNA,如:内部标记的 RNA 及共转录带帽结构 RNA。利用该试剂盒得到的 RNA 适用于 RNA 结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase 保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA、RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗。
    HiSribe T7 高效 RNA 合成试剂盒的优势:
    • 单独的 NTPs 使反应设置更灵活
    • 每次反应产量高达 180 μg
    • 用帽结构类似物进行 RNA 加帽反应,产量高达 30-40 μg
    • 少量模板即可高效转录
    • 多次冻融仍能保持zuì佳活性
    HiSribe T7 高效 RNA 合成试剂盒组份:
    - T7 RNA 聚合酶混合液
    - 反应缓冲液
    - ATP、GTP、UTP、CTP(100 mM)
    - FLuc 对照模板

    名称:黄嘌呤
    货号:QN0538
    规格:1g
    CAS号:69-89-6
    分子式:C5H4N4O2
    分子量:152.11
    储存条件:RT
    纯度:≥99%

    名称:GoldView II型核酸染色剂(5000×)
    货号:QN1021
    规格:0.5ml
    GoldView II是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型花青类核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldView II与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度比EB强5-10倍,使用方法与之完全相同。GoldView II与核酸结合后,zuì大吸收峰为497nm,另外,其在254nm处也有一强吸收峰,发射波长为520nm,在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而且也可用于染RNA。

    通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用Goldview II代替EB不失为一种明智的选择。
    本产品为DMSO溶解,低温时为固体状态,温度到达20℃以上即可融化。

    储存条件:-20℃

    名称:碳酸钠-重碳酸钠缓冲液(0.2M,pH9.2-10.7)
    货号:BTN160137
    规格:100ml

    名称:Tris-HCl缓冲液(1mol/L,pH8.5,RNase free)
    货号:GL1332
    规格:500ml
    用途:
    常规pH缓冲液,常用于RNA相关实验

    注意事项:
    无菌溶液,用DEPC处理的酸调pH值。

    储存条件:室温,6个月

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    相关实验
    • 盘点 PCR 的七大应用领域

      性酶切。 除了制备插入片段,PCR 也是一种在在克隆后筛选克隆是否携带目标插入片段的有效方法。引物经过设计,可以用于确定载体中插入片段是否存在和插入方向。 4.突变 PCR 克隆的一大优点是能够通过克隆将所需突变引入目的基因中,以便进行突变研究。在定点突变中,经过设计的 PCR 引物可将碱基置换、删除或插入整合到特定序列中。如图 5所示,引物定位到已克隆至质粒中的序列上。随后,含有引入突变的 PCR 产物通过自我连接,重新生成环状质粒,并用于转化感受态细胞。 图 5.PCR 用于定点突变。该方法使用非重叠

    • 大肠杆菌感受态细胞的制备、重组DNA的转化、克隆筛选

      (如果用玻璃棒涂抹,酒精灯烧过后稍微凉一下再用,不要过烫)。(2) 菌液完全被培养基吸收后,倒置培养皿,于37℃恒温培养箱内培养过夜(12-16小时),待菌落生长良好而又未互相重叠时停止培养,对于可以蓝白斑筛选的质粒和菌株来说,此时应该能清楚地看到蓝色和白色菌落。用 CaCl2法制备的感受态细胞,可使每微克超螺旋质粒 DNA产生5×106-2×107个转化菌落。在实际工作中,每微克有105以上的转化菌落足以满足一般的克隆实验。4) 检出转化体和计算转化率各实验组在培养皿内菌落生长状况及结果分析转化

    • PCR/RT-PCR指南---PCR产物克隆

      ) 利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,在每条PCR 扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆 系统和Topo TA克隆 系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR 产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。 所以TA克隆 不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR 产物进行优化,不需把PCR 产物做平端处理(Invitrogen另有平端载体供高确

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