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593
- 英文名:
pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
特别提示:包括pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照
英文名称:pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control
产品规格:1μg
pGM-CMV-Luc是以CMV作为启动子,启动Luciferase在细胞内的表达,主要用于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)报告基因的阳性对照和动物的活体成像实验等。通过对质粒上可以被预测出的转录因子结合位点全部进行适当的突变处理,在不改变质粒功能的情况下,使质粒对转录因子的非特异结合降到了最低。
质粒图谱
使用说明
pGM-CMV-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
1) 本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2) 为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
质粒元件信息:
| CMV promoter | 32-634 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 663-685 |
| Luciferase reporter gene | 717-2379 |
| SV40 late poly(A) signal | 2414-2635 |
| SV40 early promoter | 2683-3101 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region | 3126-3920 |
| Synthetic poly(A) signal | 3945-3993 |
| Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region | 5108-5968 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 6073-6226 |
储存条件:-20℃。
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文献和实验待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒;2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株,通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等;3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染,设置不同的检测时间点,一般为24h/48h;4、外界干预: 转染后,可进行物理/化学/病毒等的相应刺激;5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作;6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
【求助】关于构建目的基因启动子序列的虫荧光素酶报告基因重组质粒的问题请教
longgyin8341 最近想做虫荧光素酶报告基因,但是从来没有做过,想求院子里高手指教: 我是要观察一种药物是否能作用于细胞内的几种核受体(NFkB,PPAR,ER(目前还不清楚究竟是哪个,需要分别试验))的启动子区域,影响这几个核受体的转录水平,从而影响细胞的一些功能(比如凋亡等)。计划将这三种核受体的启动子区域分别扩增出来,然后与虫荧光素酶(或其他报告基因)构建重组质粒。再分别转染细胞,加入药物处理,观察荧光素酶的活性,以探索药物是否
测试的均值。图9 pRL-TK载体的环形图。附加描述:内含子的位置,Rluc ,编码Renilla荧光素酶的cDNA,Ampr,在E.coli中编码氨苄抗性,ori, 在E.coli中质粒复制起始区。Rluc和Amp r基因中的箭头表示转录的方向。小 结在双遗传报告基因的应用中,一个报告基因活力的改变,与基因表达的特定实验条件相关,而第二个报告基因的组成性活力提供了内对照,使实验值可以规一化。Promega的新的双报告基因测试系统,在单管中测试两个荧光素酶报告基因,此两个荧光素酶报告基因具有兼容的化学
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