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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
165
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2ml
特别提示:包括5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
产品货号:SY0349
产品规格:2ml
本品用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的空间结构,消除了蛋白结构之间的差异。因此,电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。
注意事项
1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2) 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。
3)5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液必须完全溶解后再使用。
操作方法
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解5×SDS-PAGE上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
2.按照每4 μl蛋白样品加入1 μl 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。
3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。
4.冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
储存条件:-20℃,有效期一年。
除了5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液,,我公司还供应以下相关产品:
名称:低pH缓冲液套装
货号:BTN100830
规格:30次
本产品用于Native-PAGE(非变性聚丙*酰胺凝胶电泳)分离碱性蛋白质,与中pH和高pH系统相比,它使用不同的电泳染料。同时电泳时正负极要颠倒。本产品的特点是即开即用,省去用户单独配置每种溶液的麻烦。
产品组成:
| 成份 | 规格(30次*) |
| 4×浓缩胶配胶液(pH6.7) | 100ml |
| 4×分离胶配胶液(pH4.3) | 200ml |
| 低pH电泳液(pH4.5) | 10L(干粉) |
| 5×低pH上样液 | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
*注:1次是指的一次mini-Gel电泳
储存条件:常温运输及保存(5×低pH上样液需要-20℃保存),有效期为一年。
名称:p27蛋白检测试剂盒
货号:KFS238
规格:50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白, 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞,作用温和,提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究(本试剂盒包含兔抗p27抗体),但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究,因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。
名称:微囊藻素(PP1和PP2A抑制剂)(Microcystin-LR)
货号:SY0333
规格:500μg
微囊藻素Microcystin-LR是一种分离自蓝藻细菌 Microcystis aeruginosa的环状七肽毒素,可有效抑制蛋*磷酸酶PP1(protein phosphatase 1 ,PP1)和 PP2A ( protein phosphatase 2A ,PP2A),抑制PP2A和PP1的IC50分别为0.04nm、1.7nm。Microcystin-LR结合磷酸酶后通过共价作用使其活性亚基失活。
Microcystin-LR对蛋白酶没有作用,因此常作为一种磷酸酶抑制剂用于蛋白激酶研究中。
CAS:101043-37-2
分子式:C49H74N10O12
分子量:995.2
纯度:≥95%
外观:粉末
溶解性:溶于DMSO,*醇
储存条件:-20℃,有效期1年
结构式:
名称:核蛋白提取试剂盒(蛋白组实验、质谱适用)
货号:HR8020
规格:50T/100T
名称:植物膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
货号:HR0177
规格:50T/100T
跨膜蛋白承担各种生物功能,扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套,因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构,因而妨碍了膜蛋白的功能研究。
植物质膜蛋白提取试剂盒(二维电泳用)是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。植物膜蛋白提取试剂盒可以从各种植物中提取膜蛋白,可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于双向电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒,请联系我公司,选用其它产品号的产品。
储存条件:蛋白酶抑制剂-20℃保存;其它组分2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点:
1.使用方便。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1.每500μl膜提取液A中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2.取200mg植物组织样本剪碎,置于研钵中用液氮研磨。(没有液氮也可直接置冰上研磨即可)
3.研磨后加入500μl提取液,混匀后于一个干净离心管中在2-8℃振荡1小时(如果没有2-8℃振荡条件,也可直接置2-8℃冰箱静置1小时,中间每隔10分钟涡旋振荡混匀)。
4.将提取液在2-8℃条件下12000×g离心5分钟,取上清。
5.在上清中加入5μl抽提液B,充分混匀。
6.在37℃水浴10分钟。
7.在37℃ 1000×g离心3分钟。
8.此时液体分为2层,移除上层部分,小心吸取下层管底部大约50μl液体。
9.将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验或用试剂C稀释后,进行下游实验。
注:
① 建议用BCA 法或Lowry 法进行蛋白定量。
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文献和实验一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。 50倍TAE缓冲液的配制方法为 1. 称取下列试剂于1L烧杯中: Tris 242g Na2 EDTA.2H2 O 37.2g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心(3000 rpm,5 min)收集 Agarose 珠子,弃掉上清,用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。(小心吸取上清,避免触碰底部珠子) 收集沉淀,加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀,轻混均匀后煮沸 5 min,12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管,进行 Western 检测。
2~4 h,使抗体与 protein A 琼脂糖珠偶连; 免疫沉淀反应后,在 4 ℃ 以 3 000 rpm 速度离心 3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用 1 ml 裂解缓冲液洗 3~4 次;最后加入 15 μl 的 2 × SDS 上样缓冲液,沸水煮 5 分钟; SDS-PAGE,Western blotting 或质谱仪分析。 四、通过免疫共沉淀确定结合蛋白 用磷酸盐缓冲液洗 30 块 10 cm 培养板上的适宜
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