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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 英文名:
Anti-Myc Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100μl
特别提示:包括抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质
英文名称:Anti-Myc Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
产品货号:WE0329
产品规格:100μl
抗Myc标签免疫亲和介质是将抗Myc标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,此种琼脂糖能够用于免疫沉淀或者免疫共沉淀,检测含有Myc标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成第410-419位多肽序列(EQKLISEEDL)
应用范围:IP
除了抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质,,我公司还供应以下相关产品:
名称:超灵敏ECL化学发光试剂盒
货号:YT061
规格:共100ml
本Western萤光检测试剂是一种特超敏ECL化学发光试剂盒,发光效果显著优于YT060高灵敏ECL化学发光试剂盒,可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。
本试剂盒灵敏度极高,比DAB显色的灵敏度至少高1000倍,比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上,实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级,500飞克辣根过氧化物酶用本试剂盒检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时,信噪比大于5。
本试剂盒系统发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中,加入100微升本试剂盒工作液后在不同时间点通过化学发光仪检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱, 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右,120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右。
检测不同剂量HRP-IgG,20分钟后发光效果几乎不变,120分钟后发光效果仍然良好。
本试剂盒系统的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量,以免获得过深的难以比较灰度的条带。本试剂盒系统稳定性较好,37℃水浴孵育30天,和4℃保存的试剂相比,对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒系统背景很低,对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。
储存条件:4℃避光,有效期一年。
名称:双显色抗大鼠IgG免疫组化试剂盒CY3和过氧化物酶
货号:ZN1852
规格:1ml|2ml|5ml
本试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样,对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,兼具高敏感性,低背景和操作简便的优点。CY3 比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。CY3 在 554nm 激化,在 568-574nm 发射荧光,呈鲜红色。免疫组化双显色试剂盒采用 CY3+过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素(SABC-CY3+POD),用户根据实验需要,可在同一张切片上用两套显示系统观察。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 正常兔血清封闭液(稀释比1:10) | 1ml/2ml/5ml |
| 生物素化兔抗大鼠IgG(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
| SABC-Cy3(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
| SABC-POD(参考效价1:100) | 0.1ml/0.2ml/0.5ml |
另附有四个滴瓶可供稀释试剂用。
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2 去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性,PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10),37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(大鼠IgG),37℃孵育 1-2 小时或4℃过夜。PBS 冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗大鼠IgG,37℃孵育30 分钟。PBS 冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC-Cy3(参考效价1:100)或SABC-POD(参考效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3 次。
8. 显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选 DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验的,但是这结果是不是假阳性呢?还得做个阴性对照。阴性对照如何设置呢?考虑到整个实验体系会出现 beads、抗X抗体、诱饵蛋白 X、靶蛋白 Y(co-IP): 可能出现的假阳性来源 需要的阴性对照 抗 X 抗体结合非特异的蛋白 与 IP 一抗种属亚型相同的免疫球蛋白(比如,抗 X 抗体是 Mouse IgG,阴性对照可使用 Mouse 免疫球蛋白) beads 对蛋白的非特异结合* 同上,此外还可进行 Pre clear,IP 正式实验前排除非特异结合蛋白。如果使用琼脂糖
的转录,从而阻断II.-2合成和分泌,使T细胞的扩增和分化受阻。它还能抑制c-myc和IFN-γ基因的转录,后者对于T细胞的活化和扩增也有影响。FK-506是继环孢素A后发现的另一种真菌代谢物,其结构与环孢素A不同,但它的作用与环孢素A极为相似。FK506应用剂量较低,故其副作用较小。其他的抗有丝分裂的非特异性免疫抑制剂如硫唑嘌呤、环磷酰胺、氨甲蝶呤常与皮质激素联合应用作为常规免疫抑制剂治疗一些自身免疫病。 三、免疫净化 免疫净化(immunoablation)疗法
是被公认为最广泛使用的亲和标签用于一系列的蛋白纯化目的。 除此之外,它可以检测和纯化重组蛋白而无需使用蛋白特异性的抗体或探针,同时抗 His 标签抗体的存在用于 His 标签蛋白的检测中使 6xHis 标签更加的普遍和受欢迎。 亲和纯化蛋白 在大肠杆菌和其他原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白通常使用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个过程中,支撑物 (通常是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用合适的耦合试剂来进行衍生,比如氨
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