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- 文献和实验
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40
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1只
以下是硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管1只多少钱的详细介绍,点击了解更多DNA纯化产品:
操作流程:
1.硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管1只多少钱根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
实验要点 :
1.硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管1只多少钱CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。非冻型组织RNA保存液 小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
储存事项:
A. 在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
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兔抗KRT31多克隆抗体 英文名:Anti-KRT31 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
小鼠抗CYP17A1单克隆抗体 英文名:Anti-CYP17A1 mouse monoclonal antiboy 冷冻(-20℃)
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兔抗GF6多克隆抗体 英文名:Anti-GF6 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
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兔抗VTN多克隆抗体 英文名:Anti-VTN rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
硅胶膜离心吸附柱 ( 大提 ) 收集管1只多少钱芒果苷 Mangiferin 4773-96-0 质量规格:≥90%,BR
20(R)人参皂苷Rg3 ;(S)Gin CAS 80952-72-3 规格: 20mg 订购|咨询
毛蕊异黄酮(标准品) Calycosin 20575-57-9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯;Euphor CAS 218916-52-0 规格: 20mg 订购|咨询
毛蕊异黄酮苷(标准品) Calycosin-7-O-β-D-glucoside 20633-67-4 质量规格:HPLC≥98%,标准品
去芹菜糖桔梗皂苷D;Deapio-pla CAS 78763-58-3 规格: 10mg 订购|咨询
没食子儿茶素(标准品) GC; (-)-gallocatechin 3371-27-5 质量规格:HPLC≥98%,标准品
霹雳萝芙木碱;Perakine CAS 4382-56-3 规格: 10mg 订购|咨询
没食子儿茶素没食子酸酯(标准品) GCG;(−)-Gallocatechin gallate 4233-96-9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
米力农;Milrine CAS 78415-72-2 规格: 20mg 订购|咨询
没食子酸 Gallic acid 149-91-7 质量规格:>98%,BR
木兰花碱;Magflorine CAS 规格: 20mg 订购|咨询
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文献和实验【样品】冻存的全血样本 【样品准备】 将冻存的血液样品充分融化后混匀。 【操作步骤】 1.活化硅胶膜 将吸附柱放入收集管中,加入250 ul Buffer BL,12,000 g离心1 min,活化硅胶膜。 2.样品消化 (1)取20 ul Proteinase K至1.5 ml离心管底部,然后加入200 ul充分混匀的全血样品,涡旋振荡10 s。 (2)加入200 ul Buffer gA1,旋涡振荡10 s,70℃孵育1 h,期间震荡1 ~ 2次。 3.孵育结束后加入200 ul无水
裂解物 10 次或直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒),可以剪切DNA,降低粘稠度和提高产量。 d. 将裂解物13,000rpm离心5-10分钟,沉淀不能裂解的碎片和结合有多糖多酚的PLANTaid, 将所有裂解物上清转到一个新离心管。 e. 较精确估计裂解物(上清)体积,加入0.5体积的无水乙醇,此时可能出现沉淀,但是不影响提取过程,立即吹打混匀,不要离心。 f. 立刻接操作步骤项下3。 3. 将混合物(每次小于700μl,多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中
和可能出现的沉淀都加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm离心30秒,倒掉收集管中的废液。 10.加入500μl抑制物去除液IR,12,000rpm 离心30秒,弃废液。 11.加入700μl漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。 12.加入500μl漂洗液WB,12,000rpm 离心30秒,弃掉废液。 13.将吸附柱AC放回空收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中
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