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- XY-TE-0940
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
两年
- 英文名：
E.coli DB3.1 Strain
- 库存：
900
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
C41(DE3)菌株能有效表达来源于各个物种包括细菌酵母，植物，病毒和动物等多个物种的有毒蛋白，这是因为该菌的基因存在突变，可以包容有毒蛋 白的表达。C41(DE3)来源于 BL21(DE3)，含有一个基因突变，能够降低 T7 RNAP 的酶活力，所以能够阻止表达有毒蛋白细胞的死亡。正如标准的BL21(DE3)菌株 C41(DE3)是DE3的溶源性菌株，它在 lacUV5 启动子额 下游含有 T7 RNA 聚合酶基因，适合表达克隆于 T7 启动子表达载体上的基因。 但是，C41(DE3)存在 Ion 和 ompT 蛋白酶的缺陷，而且蛋白表达量比 BL21(DE3)稍低。本菌株基本信息如下：
1. 抗性：无。
2. 培养基：LB。
3. 菌株类别：大肠杆菌。
4. 培养条件：37℃，有氧，LB。
5. 质粒转化：42℃热激。
6. 保存方式：20%甘油，-20℃。
7. 基本应用：用于蛋白表达。
8. 基因型：F –ompT hsdSB (rB - mB - ) gal dcm (DE3)
大肠杆菌DB3.1菌种运输及保存：
低温运输、-80℃保存，有效期一年。
大肠杆菌DB3.1菌种使用方法
收到甘油菌后，请及时在固体平板上划线培养，挑取单菌落接种到液体培养基中，震荡培养后使用并保存甘油菌。 本产品可用于常规大肠杆菌感受态细胞制备、转化等实验，具体步骤请见 分子克隆手册等工具书。
大肠杆菌DB3.1菌种注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究，不能用于动物，人体以及作为食品添加剂等用途。
2. 使用甘油菌时可不完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可，也可完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，菌株的活力会逐渐下降。
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文献和实验大肠杆菌(Escherichia coli)是分子遗传学实验、基因工程操作中广泛采用的一种受体菌，它的遗传背景研究的比较详细，常用做寄主进行基因扩增及外源基因的表达。 一. 实验目的 : 掌握大肠杆菌的对照培养、单菌落的分离及菌种保存方法。 二. 实验原理 : 大肠杆菌除本身的核染色体外，往往还含有质粒(Plasmid)DNA，这是一种双链闭合环状
douermm 最近需要扩增质粒，RNAi用的。接大肠杆菌种用的LB培养基，看有的文章上写的配成PH=7.0的，有的写配成PH=7.5的，到底应该配成多少呢？还有，用买的比如麦康凯培养基，会不会比自己配的效果好？谢谢~！ slytjiaofei ph7或7.5对大肠杆菌生长基本没有任何影响。 douermm 谢谢楼上~ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿
酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。 2、PCR产物双酶切后回收，在T4DNA连接酶作用下连接入载体。 （三）获得含重组表达质粒的表达菌种 1、将连接产物转化大肠杆菌DH5α，根据重组载体的标志（抗Amp或蓝白斑）作筛选，挑取单斑，碱裂解法小量抽提质粒，双酶切初步鉴定。 2、测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确，进入下步操作。否则应筛选更多克隆，重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点。 3、以此重组质粒DNA转化表达
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