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6个月
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上海机纯实业有限公司
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常温,避光
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200ml/KIT
品牌: gelatins
数量: 大量
保质期: 6个月
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牛外周血单个核细胞分离液KIT产品为本公司畅销的产品之一
中文名:牛外周血单个核细胞分离液KIT
产品规格:200ml/KIT
用途:本产品仅供实验室药品检测用,不作其他用途。
购买我公司的牛细胞分离液我们将免费为您提供全程技术指导,解决您的后顾之忧。
分离原理:
除去血液中的纤维蛋白或肝素处理血液以1:1的比例用生理盐水或平衡盐溶液稀释,在分离溶液中分层,低速离心30分钟。通过离心,迁移能力不同终形成不同的细胞层。
大部分的红细胞和粒细胞通过梯度迁移形成颗粒状。由于其密度不同,淋巴细胞和其他单个核细胞(单核细胞和血小板)分布在在血浆和LSM两层中间。淋巴细胞可以通过回抽分层回收,在进一步去除血小板,LSM和血浆。
用途:
用于体外分离人外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞。
分离方法:
分离混合血液白细胞早期的方法,总是伴随红细胞聚集,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞密度增加聚集,同时可以从离心管上部收集白细胞。
通过使用甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在甲泛影钠溶液中分层,低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞,和单个核细胞(淋巴细胞)和血小板可以从两个分层之间收集。
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文献和实验首先,从细胞的培养过程下手。外泌体来自细胞,因此必须先从源头抓起。大部分的细胞培养过程中都是带有血清的,无论是牛血清、马血清等都是含有异源外泌体的,而我们研究的目标通常是细胞所分泌的外泌体,因此需要尽可能的去除这些异源外泌体的干扰。那么我们需要怎么做呢? 这里需要了解一个大原则:在细胞正常生长的条件下,尽可能的减少血清外泌体或者不使用血清。方法一,可以通过超速离心的方法去除血清中外泌体。方法二,通过外泌体专用无血清培养基来替代完全培养基,维持细胞
死亡,并且运输难度大。对于这些考虑,组织保存液MACS组织保存液(130-100-008)可以使新鲜固体组织在2-8 ℃ 保存 48 小时并避免细胞激活和凋亡等背景效应。 2. Buffer配制对酶活的影响? 在组织解离过程中,缓冲液(Buffer)的配制对酶活性有着至关重要的影响。配制不当的缓冲液会显著降低酶活,导致解离效率低下、细胞损伤增加或解离失败。 常见影响酶活性的关键因素:pH值,离子种类与强度,渗透压,温度,其他添加剂等。 按照说明书需要精心配制buffer,确保其维持最佳的pH、离子环境
rich kit,一次搞定。 强烈推荐这个 kit,太牛了,在别家都缴械的时候,它一锤定音。不过价格也比别家都牛,10 次反应就 130 美元,其实实验室大可以备一个,就是防备超高 GC 又长的片段。不过这个 kit 非高保真,送了三个克隆测序,各在不同部位有突变。于是我就从 A 克隆切一段接到 B 克隆上,又从 C 克隆切一段接 B 克隆上。问题是 GC 比太高测序也很困难,正常 GC 能测 1 K 左右,到了 High GC 就能测个五六百,这时要多准备些引物。 PCR 产物
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