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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
DNA meter for Southern Blot
- 库存:
870
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
超螺旋DNA分子量标准产品及特点:
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5 uL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

超螺旋DNA分子量标准运输及保存:
低温运输、-20° C保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5 uL。

超螺旋DNA分子量标准疑难解答
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。

超螺旋DNA分子量标准相关资料
琼脂糖凝胶形成的分子机制
Agarose(琼脂糖)是从Agar(琼脂,海藻细胞壁的成分)中纯化出来的非离子型的、主链由agarobiose(琼脂二糖)聚合而成的一种线性多糖,平均分子量为12000。琼脂二糖由1,3连接的β-D-galactopyranoseD-galactose(β-D吡喃半乳糖)和1,3连接的3,6-anhydro-a-L-galactopyranose(3,6脱水L-吡喃半乳糖)以1,3--β糖苷键连接而成双糖聚合物。琼脂糖加热溶解后在水溶液中是以randomcoil的状态存在。随着温度降低到45℃左右,两条琼脂糖聚糖链互相形成双螺旋。随着温度的继续降低,琼脂糖双螺旋相互以氢键交联再聚合成束,形成网络系统。由于琼脂糖不含有带电荷的基团,而且不吸附被分离的物质,很容易制备,故成为核酸电泳必不可少的工具。
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文献和实验佚名 双螺旋DNA进一步扭曲盘绕则形成其三级结构,超螺旋是DNA三级结构的主要形式。自从1965年Vinograd等人发现多瘤病毒的环形DNA的超螺旋以来,现已知道绝大多数原核生物都是共价封闭环(covalently closed circle,CCC)分子,这种双螺旋环状分子再度螺旋化成为超螺旋结构(superhelix或supercoil),如图15-11
以λ/Hind III为代表的λDNA酶切片段用作电泳分析中的分子量标准,会发现电泳后分子量条带不对的问题。 解释原因如下:在Lambda DNA分子的左右臂存在着12个碱基组成的具有互补顺序的单链突出端-COS位点,COS位点的退火复性,在λDNA片段电泳分离时会出现问题,含左右臂片段在胶上应出现的地方条带会减弱或完全看不到,而复性的左右臂片段会结合成大的片段,即在较大的分子量区域内产生一个额外的条带,这就造成了不正常的带型。 解决以上问题的办法
mmol/L1 mmol/L dsDNA = 6.7 OD2601 mmol/L ssDNA = 10.0 OD2601 mmol/L ssRNA = 8.3 OD260(3)分子量:1个脱氧核糖核酸碱基的平均分子量为333 Daltons1个核糖核酸碱基的平均分子量为340 Daltons(4)核酸末端浓度:环状DNApmol ends = pmol DNA × number of cuts ×2线性DNApmol ends = pmol DNA ×(number of cuts ×
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