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- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0530
- 2025年11月21日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Column RNA CLEAN
- 库存：
870
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品用于纯化并回收体外转录得到的RNA分子和从各种材料中提取得到的总RNA，能有效地去除RNA样品中污染的杂质。它具有下列特点:
1.可以回收20nt以上的RNA。
2.操作简单快速，只需要5分钟。
3.回收率高达80%以上。
4.一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
5.得到的RNA纯度一般都在1.9以上，可以用于各种后续实验。
低载量PCR片段纯化试剂盒运输及保存：
常温运输和保存，有效期一年。
低载量PCR片段纯化试剂盒使用方法
1.在RNA溶液中加入9倍体积的柱式RNA纯化溶液A，颠倒数次充分混匀。
注意：如果在1.5mL塑料离心管中操作，RNA溶液的体积不要超过150uL，否则加入9倍体积的溶液A后，体积不够。另外，由于会因为非特异性吸附等原因，整个操作会丢失一定量的RNA，所以RNA的起始总量不能低于5ug。如果低于5ug最好加入5ug的载体RNA（如酵母tRNA等）。
2.根据最后体积多少分一次或两次上柱，即将混合液转移到离心吸附柱中。每次转移后12000g室温离心半分钟并保留穿透液（待确认RNA回收成功后再弃之）。
3.加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000g室温离心半分钟并弃穿透液。
4.再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000g室温离心半分钟并弃穿透液。
5.干甩半分钟，即将空离心吸附柱和套管12000g室温离心半分钟。
6.加30-100uLRNA洗脱液到离心吸附柱中，12000g室温离心半分钟即得回收的RNA。
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文献和实验说明都显示单片段插克隆效率> 95%——片段越多效率会下降的）。市售产品中，是否包含感受态细胞，是否包含质粒纯化试剂或者 PCR 纯化试剂，都会影响产品单价。 后继的筛选验证工作同经典方法一样——抗性筛选，挑克隆扩增纯化，电泳+酶切或者 PCR 验证，最后挑几个最有可能的克隆去测序验证。如今分子克隆中的 PCR 一般都会选择高保真酶——出错率比 Taq 低得多、扩增长片段效果更好，要是几十 kb 还得是 EX 加长版高保真酶——相比后继测序验证的费用，这钱万万省不得的。 总而言之，基于同源序列的无缝
糖凝胶上检测分析。如图一所示 图一：2.2 超声破碎后，8000g，30秒，4°C,离心。将上清移入新的管子中。开始准备进行染色质免疫共沉淀（IP）。2.3 每份超声样品取50ul，这时的样品标记为INPUT，用于定量DNA浓度和作为PCR的空白对照。超声后的染色质应立刻冻入液氮中或者储存于-70°C可储存2个月。避免多次反复冻融。3检测DNA浓度1INPUT样品用于为后来的IP样品计算DNA浓度。DNA可采用PCR纯化试剂盒（加入70ul洗脱液，接着进入3.2a）或者采用酚/氯仿抽提（加入350ul
过的 DNA 聚合酶增强了与模板的亲和度，其灵敏度更高，因而所需的模板量少。过低的模板量会减少 PCR 的产量，过高的模板量可能造成非特异性扩增，所以 DNA 模板量的优化尤为重要。 除了 gDNA、cDNA 和质粒 DNA，PCR 产物也可作为模板以获得更高的产量。但 PCR 产物中存在的残余反应组分（如引物、dNTP、盐和副产物）可能会影响下一次的 PCR 反应。所以推荐在下一次 PCR 前使用 PCR 产物纯化试剂盒将 PCR 产物先进行纯化。 【DNA 聚合酶】 DNA 聚合酶是PCR扩增中最关键
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