人 PRMT1 甲基转移酶

特别提示：包括人 PRMT1 甲基转移酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：人 PRMT1 甲基转移酶
英文名称：Human PRMT1 methyl transferase
产品货号：SV1135
产品规格：50U

概述:
PRMT1 是一种主要的蛋白质精氨酸甲基转移酶。可在体外和体内特异性甲基化组蛋白H4 的 3 位精氨酸（Arg 3）。组蛋白 H4 的 Arg 3 甲基化有助于核激素受体的转录激活。p53 引发的转录激活中，PRMT1、p300 和 CARM1 的有序协同作用可在异位的 p53 表达后的，和/或经 UV 放射后的 GADD45 基因上观察到。
来源:
PRMT1 来自表达 PRMT1 cDNA 的 E.coli GST 融合蛋白表达系统。
反应条件:
1X HMT 反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl, 5 mM MgCl2, 4 mM DTT（pH 9.0 @ 25℃）]，加入 160 μM SAM，37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X HMT Reaction Buffer
32 mM S-adenosylmethionine (SAM)
质保声明:
未检测到蛋白酶污染。
单位定义:
1 单位指在 25 μl 反应体系中，37℃ 条件下 10 分钟催化 1 pmol 甲基基团转移到合成的多肽底物所需的酶量，合成的多肽底物为组蛋白 H4 前 17 个氨基酸。
浓度:
2,000 units/ml

除了人 PRMT1 甲基转移酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
货号：YT512
规格：500U
本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的zuì短长度为3个核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassium cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassium cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. DNA 3’末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在zuì低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 参考下表格设置反应体系：
DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在zuì低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。