环孢霉素A试剂

特别提示：包括环孢霉素A在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：环孢霉素A
英文名称：Cyclosporin A
ＣＡＳ＃：59865-13-3
产品货号：QN0099
产品规格：250mg

本品是一种免疫抑制剂，也称Cyclosporine或Antibiotic S 7481F1，是一种常用的免疫抑制药物，在器官和骨髓移植中用于阻止排斥反应。Cyclosporin A通过干扰T细胞的活性及生长来降低免疫系统活性 [1][2]。Cyclosporin A与淋巴细胞尤其是T细胞的胞内受体cyclophilin结合形成复合物表面，从而特异性靶向攻击calcineurin (phosphatase 2B) 活性, 其IC50 值为5 nM。Cyclosporin A也会抑制活化的T细胞中IL-2产物，其IC50 值为10 nM[3]。不论是体外培养FJ17细胞还是FJ17转染的小鼠模型体内，Cyclosporin A都能够抑制白介素IL-2和IL-5产生，结果表明cyclosporin A通过T细胞中IL-5合成抑制的方式抑制气道嗜酸性过敏炎症反应[4]。cyclosporin A以干扰线粒体通透性转运孔(MPTP)打开的方式影响线粒体功能，进而抑制细胞色素c释放和调控细胞凋亡[5]。

CAS：59865-13-3
分子式：C62H111N11O12
分子量：1202.61
储存条件：2～8℃
纯度：97%
别名：环孢霉素A;环孢多肽A;环孢灵;环孢素;环胞霉素A
性状：无臭无味
溶解性：在甲*、乙醇或乙*中极易溶解，在醋酸*酯中易溶，在丙*或乙*中溶解，在水中几乎不溶。

使用浓度：
Cyclosporin A的具体使用浓度请参考相关文献，并根据自身实验条件(如实验目的，细胞种类，培养特性等)进行摸索和优化。
应用实例(仅作参考)：
1) 为检测Cyclosporin A对calcineurin的抑制活性，用100 nM Cyclosporin A 处理Jurkat cells 1h，然后测定磷酸酶活性，发现Cyclosporin A有效抑制Ca2+依赖的磷酸酶活性。另外，在含有OKT3和PMA及不同浓度Cyclosporin A (0.001-10000nM)培养基中，Jurkat细胞孵育24h，检测IL-2产物的活性，发现Cyclosporin A抑制IL-2的IC50值为10nM[3]。
2) 为检测Cyclosporin A在体外对T细胞中细胞因子的作用，FJ17与mitomycin-C处理的脾细胞一起培养24h，在培养体系中分别加入不同浓度的Cyclsporin A (1,10,100nM)，检测IL-2, IL-4和IL-5产物，发现Cyclosporin A 以剂量依赖的方式抑制IL-2, IL-4和IL-5产物。另外，在体内实验中，发现30mg/kg Cyclosporin A明显抑制IL-2和IL-5的mRNA表达[4]。

注意事项：DMSO溶解配制储存液(100 mg/ml)，或乙醇配制储存液(200 mg/ml)。建议分装后-20ºC避光保存，避免反复冻存，至少可存放6个月。

除了环孢霉素A试剂,环孢霉素A,环孢多肽A,环孢灵,环胞霉素A,环孢素，我公司还供应以下相关产品：



名称：氨苄青霉素溶液(100mg/ml)
货号：RFT174
规格：5×1ml
氨苄青霉素是一种β-内酰胺类抗生素,干扰肽聚糖的交联从而抑制细菌细胞壁的合成，属于氨基青霉素类。氨苄青霉素时常被用于分子生物学实验研究中，如用于配制含氨苄青霉素的LB培养基或LB平板等。氨苄青霉素溶液由氨苄青霉素溶于水组成，经0.22μm过滤除菌，可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为50～100μg/ml，其中严紧型质粒常采用20μg/ml，松弛型质粒常采用60μg/ml。

使用方法：
根据实验具体要求操作，一般Amp在LB中终浓度为50～100μg/ml。可以按照1/1000 LB体积加入100mg/ml Amp溶液，如100ml LB中加入100μl Amp 100mg/ml。

注意事项：
1、尽注意无菌操作，避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，有效期6个月

名称：青链霉素溶液(100×)
货号：RFT181
规格：100ml
青霉素-链霉素溶液(100×)是专门用于细胞培养的双抗，经过过滤除菌，可以直接添加到细胞培养液内。一个包装即100ml青霉素-链霉素溶液(100×)可以配制10L细胞培养液。

青霉素-链霉素溶液(100×)中，青霉素的含量为10KU/ml，链霉素的含量为10mg/ml。该溶液用0.85%氯化钠配制。在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml，链霉素的工作浓度为0.1mg/ml，即按照100倍稀释使用即可。

使用方法：
1、在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100X)，比如按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X)，混匀即可使用。
2、配制细胞培养液时加入青霉素-链霉素溶液(100X)，然后再过滤除菌。配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X)，配制完成后过滤除菌即可使用。

储存条件：-20℃。

名称：泰乐菌素
货号：QN0016
规格：1g|5g
CAS：1401-69-0
分子式：C46H77NO17
分子量：916.1
别名：太乐菌素;泰乐霉素;泰洛霉素;泰洛星
储存条件：2～8℃

名称：L-甲状腺素
货号：QN0019
规格：1g
CAS：51-48-9
分子式：C15H11I4NO4
分子量：776.87
别名：2-甲状腺素;左旋甲状腺素;左甲状腺素;甲狀腺素
储存条件：2～8℃

名称：美洛昔康
货号：QN0027
规格：5g
CAS：71125-38-7
分子式：C14H13N3O4S2
分子量：351.4
纯度：99%
储存条件：室温

名称：杀稻瘟菌素S
货号：QN0028
规格：10mg|100mg
Blasticidin S是一种来自Streptomyces griseochromogenes的核苷类抗生素，通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性地抑制原核和真核生物的蛋白质合成。Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式，很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

CAS：3513-03-9
分子式：C17H27CIN8O5
分子量：458.9
纯度：＞95%(HPLC)
储存条件：-20℃
别名：灭稻瘟素

抗性基因：
目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种，一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls，另外两种是脱氨酶基因，包括从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。Bsr和 BSD基因是最常用的筛选标志，用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验，也可用于E.Coli。

应用浓度：
1)Escherichia coli
E. coli对Blasticidin S的敏感性稍差，但是转化子对Blasticidin S具有耐受性，可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选，浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。
2)哺乳动物细胞
哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。
- 25-100 µg/ml in bacteria
- 1-30 µg/ml in mammalian cells
操作步骤(哺乳动物稳转株筛选)
Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中，在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育，用于筛选稳定转染细胞株。
(1)转染后48h，用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高，抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%);
(2)每3-4天去除培养基，加入含抗生素的新鲜培养基;
(3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要增加一周或更久。
(4)转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中，加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。