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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Column Blood DNAout
- 库存:
860
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。
Southern级血液DNAout它具有下列特点:
1.DNA纯净,OD260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2.产量高,一般为1-10ug/mL全血(对哺乳动物血液)。
3.操作简单,整个过程约20分钟,全室温操作,适合大规模样品处理。
4.用量广泛,每次可以处理少达20uL(对禽类动物血液),多达1mL的血液(对哺乳动物血液)。
5.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。

Southern级血液DNAout运输及保存:
常温运输和保存,有效期一年
自备试剂:无
Southern级血液DNAout使用方法
1.在0.02-1mL新鲜或抗凝血液(冷冻血需先37℃水浴融化)中加入0.5mL红细胞裂解液(A型),吹打混匀。注意:溶液A非常容易长菌,取用需要在无菌条件下进行。
a)哺乳动物,血液使用量以300uL以下为宜,使用量越大产量越高,但产率会降低。如果血液多于300uL,重复1-2步两次可以提高产率。
b)禽类动物,血液使用量以20uL以下为宜,可以从第3步做起。
2.室温12,000-15,000rpm离心5分钟,沉淀呈粉红色,小心倾去上清。
3.再短暂离心半分钟,吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解,但一般可以省略。
4.向有沉淀的离心管内加入0.5mL溶液A(溶液A有少量晶体沉淀,用前需要摇晃均匀),用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞,释放DNA,所以吹打越充分越好。
5.静置2分钟待溶液变清亮后,将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟,以使DNA与膜充分结合。
6.12,000rpm离心半分钟,DNA将吸附到膜上,弃收集管中的废液。
7.加入0.7mL的通用洗柱液,12,000rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
8.加入0.3mL的通用洗柱液,12,000rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
9.12,000rpm离心半分钟,甩干残留液体。此步很重要,以去除膜上残留通用洗柱液,否则会影响后续反应。
10.将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入适量30-100uLDNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液2.0在65℃预热后再使用,洗脱DNA的效果会更好。
11.12,000rpm离心半分钟,离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。

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