洁特10～200µl一次性微量吸头(无DNase/RNase

Real-time PCR实验攻略

min，去上清，注意不要触到沉淀。   4. 加入1 ml的75%乙醇，4℃14 000 rpm离心3 min，去上清。   5. 瞬时离心，用200 ul（或10 ul）的枪头小心吸去离心管底的残存液态（勿吸到管底的沉淀）。   6. 把离心管放置于超净台晾至约5-10 分钟（勿完全干燥，否则很难溶）。加入30~50 μl的无RNase的水，静止1 min 后，振荡30sec，瞬时离心。   7. 将提取的RNA立即进行下游

cDNA文库组标准流程

Superscipt II―RT，混匀; 7. 42℃反应50分钟，然后70℃，15分钟灭活反转录酶. 二、 cDNA 第二链的合成 : 1. 第一链反应完成后，取2μl一链产物－20℃冰箱中保存，待电泳检测。其余的产物合并，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega): 20μl   10×DNA Polymerase I buffer 6μl    10mM dNTP(自己配制) xμl    dd H2O 1μl    RNase H(2U/μl) 10μl   DNA Polymerase

takara产品问答--修饰酶问答

。 2.加入2.5倍体积的预冷无水乙醇，混匀，-20℃放置30～60分钟。 3.12,000 rpm，4℃离心10 min，回收沉淀。 4.用1 ml 70%的预冷乙醇清洗沉淀，12,000 rpm，4℃离心10 min，除去上清，真空或室温干燥沉淀，注意不要干燥过度。 5.使用25～50 µl TE Buffer溶解，取10～20 µl转化至100 µl的感受态细胞中。 ↑TOP Q-7: T4 DNA