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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Column Mouse Tail DNAout
- 库存:
860
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
大鼠和小鼠是重要的生命科学实验材料,鼠尾则是小鼠最佳活体样品,常用于基因型的快速检测。本试剂盒采用独特的酶和缓冲体系,可以快速得高质量、高纯度的基因组DNA。
柱式鼠尾DNAout本产品具有下列特点:
1.即开即用,不需要自己准备各种溶液。
2.简单快速,最快可在60分钟内从0.5鼠尾中提取到10μgDNA。
3.柱式法回收,所得DNA纯度高(OD260/280一般在1.7-1.9)。片段大(一般在20kb以上)、纯度高。
4.安全环保:无需有机试剂抽提。
5.可用于后续的酶切、PCR、Southern杂交、文库构建等实验。
注意:除鼠尾外,还可用于其他动物组织(心,肝、肾、脾和肌肉等)

柱式鼠尾DNAout运输及保存:
常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要低温运输,-20℃保存),有效期一年
柱式鼠尾DNAout自备试剂:氯仿
剪取0.5-1cm鼠尾(约15-30mg),尽量剪短成的1mm左右小段,放入干净的1.5mL塑料离心管中。若不需要立即使用,可以在液氮中或-80℃长期放置,或-80℃放置数天。如果是动物心,肝、肾、脾和肌肉等组织,则取30mg左右并充分剪碎。
2.加入1mL溶液A和20uL蛋白酶K溶液(10mg/mL),37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。也可以放置于65℃金属浴或水浴中保温2小时,其间每间隔10分钟涡旋混匀一次(或用手指用力弹击离心管底部数次)以帮助鼠尾酶解。对于老年小鼠鼠尾,可以适当增加酶解时间到3-4小时。如果有温控混合器使反应体系始终处于摇晃状态。,则效果更佳。
3.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备氯仿,振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12,000rpm室温离心3分钟,小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C,上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12,000rpm室温1分钟,弃穿透液。再把剩余的一半上柱,重复此操作。
7.将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8.将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12,000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30-50uLDNA洗脱液2.0。
11.12,000rpm离心1分钟,管底即为DNA溶液,可立即用于PCR,也可长期保存在-20℃。
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稳定。蛋白质的沉淀效率在 4C会更好一些。 介质纯化方法,是一个越来越受到重视的方法。其最大特点是非常适合大规模核酸抽提,并且因为受人为操作因素影响小,纯度的稳定性很高 (虽然纯度不一定比PC纯化方法更高)。其致命弱点是样品过量。介质可以分为两大类,一类是柱式的,即介质被预先装填在下面是通的柱子里;另外一类则是颗粒状(如Glassmilk、磁性小珠等)。颗粒状的介质的纯化操作与经典的醇沉淀差别不大,都是通过数次的加液-倒液过程,干燥后,溶解即可获得纯化好的核酸。柱式纯化的操作虽然也是有加液-倒液
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