- ￥100 - 2000
- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0241
- 2025年10月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Column Blood Clot DNAout
- 库存：
860
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是在xuanya凝固血液DNAOUT基础上改进的柱式升级产品，专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组DNA。
柱式凝固血液DNAout跟凝固血液DNAOUT相比，它具有下列特点:
1.DNA更加纯净，OD260/280在1.8-2.0之间，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2.操作更加简单快捷，比凝固血液DNAOUT快十分钟以上。
3.每克新鲜凝固全血DNA产量为20-50ugDNA。
4.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
柱式凝固血液DNAout运输及保存：
常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂：氯仿
柱式凝固血液DNAout使用方法
1.65℃预热溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取1mL到10-15mL塑料离心管中并将离心管放置于65℃待用。
2.称取凝固血液0.1-0.5g，加入到预热的溶液A中短暂匀浆（必须使用剪切式匀浆机）。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。注意：如果是干的血块，用量不要超过0.2g，但需将干血块剪成微小的碎片。也可以将凝固血块液氮研磨成粉后转移到装有溶液A的离心管中。
3.将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟，然后将不超过0.75mL的匀浆液上清转移到新的1.5mL离心管中。注意：尽量不要转移凝固血液碎片。
4.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀。
5.冰浴5分钟。
6.12000-15000g室温离心3分钟，将上清液转移到新的1.5mL离心管中。
7.在上清中加入0.2mL的自备氯仿，震荡器上充分振荡30秒混匀。
8.12000-15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物。
9.将上清液（大约0.6mL）小心转移到新的1.5mL离心管中。
10.在上清液中加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀。
11.分两次将混合液转移到离心吸附柱中，每次转移后需要12000-15000g离心半分钟并弃穿透液。
12.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，12000-15000g离心半分钟。
13.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000-15000g离心半分钟（此步为第二次洗涤，一般可以省略）。
14.12000-15000g离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意：此步不能省略，否则残留的通用洗柱液会影响DNA的后续反应。
15.将离心吸附柱转移到一新的离心管中，加入30-100uLDNA洗脱液2.0，12000-15000g离心半分钟，管底溶液即DNA溶液，可立即使用或放冰箱长期保存。
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文献和实验【 目的和原理 】 血液凝固(blood coagulation)过程可分为三个阶段：因子X的激活，凝血酶原激活成凝血酶，纤维蛋白原转变为纤维蛋白。由于激发凝血反应的原因和参与反应的物质不同，因子X的激活可以分为内源性和外源性两条途径。如果直接从血管中抽血观察血液凝固，此时因血液几乎没有组织因子参与，其凝血过程主要由内源性途径(intrinsic pathway)所激活。组织因子(tissue factor,TF)启动外源性途径
上是一系列蛋白质有限水解的过程，凝血过程一旦开始，各个凝血因子便一个激活另一个，形成一个“瀑布”样的反应链直至血液凝固。凝血过程大体 图3-4凝血过程的三个阶段简图 上可分为三个阶段（图3-4）：即因子χ激活成χa；因子Ⅱ（凝血酶原）激活成Ⅱa（凝血酶）；因子Ⅰ（纤维蛋白原）转变成Ⅰa（纤维蛋白）。 因子χ的激活可以通过两种途径。如果只是损伤血管内膜或抽出血液置于玻璃管内，完全依靠血浆内的凝血因子逐步使因子χ激活从而发生凝血的，称为径内源性激活途径（intrinsic
血管壁损伤时，除了血管收缩和血小板形成白色血栓达到初期止血的目的外，还需在靠血液凝固才能彻底止血，由于血收缩、血流减慢。凝血因子在伤口附近激活；受损的内皮细胞及释放出的组织因子（TF ）及暴露的胶原纤维等，分别启动内源性凝血；最后形成牢固的纤维蛋白凝块，将血细胞的网罗其中成为红色血栓，从而起到持续止血作用。 正常止血是：①血管收缩；②血小板等有形成的分的粘附和聚集；③血液涨固这三方面的有效结合。同时机体通过各种调控机制将这些止血过程限制在局部范围。一量止血屏障建立，血管壁的抗凝
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