- ￥100 - 2000
- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0302
- 2026年02月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Column Bacterial DNAOUT
- 库存：
860
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是在xuanya在细菌DNAOUT基础上开发的柱式升级产品，可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组DNA的快速提取。
1.操作简单，整个过程不到20分钟。
2.产率一般在5-20ug/mL过液培养的饱和菌液（108-109个细胞）。
3.OD260/280一般在1.8以上，可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4.DNA片段长度一般在40-50Kb左右。
5.每次提取可以处理0.1-1.5mL的细菌，也可以使用菌落。
6.价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
7.安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
细菌DNAout运输及保存：
常温运输及保存（溶菌酶干粉需要4℃或-20℃保存），有效期一年。
自备试剂：氯仿、自备无菌水。
细菌DNAout使用方法
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B十分粘稠，均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
细菌DNAout一、对革氏阴性细菌样品，不需用溶菌酶
1.将0.1-1.5mL过夜培养的菌液转移到1.5mL塑料离心管中，12,000rpm室温离心1分钟沉淀细菌，弃上清。
2.加入300uL预热的溶液A到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
3.再加入150uL预热的溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液B比较粘稠，可以采取称量方法取用，150uL约等于150-160mg。也可以将1mL枪头剪去一截再吸取。
4.65℃放置3-5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
5.加入200uL自备氯仿，震荡混匀10-30秒，此时溶液将呈乳白色。
6.12,000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
7.加入1.5倍体积(约0.7mL)的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
8.12,000rpm室温离心1分钟，DNA将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
9.将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12,000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
10.重复上步操作一次。
11.空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
12.加50-100uL通用洗脱液，室温放置3-5分钟。
13.12,000rpm室温离心1分钟即得DNA溶液。
14.由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的DNA。
15.直接取5-10uL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。
细菌DNAout二、对革氏阳性细菌样品，需用溶菌酶
1.将0.1-1.5mL过夜培养的革氏阳性细菌12,000rpm室温离心1分钟后,重悬于0.6mL溶菌液中（溶菌液配制:30mL无菌水+600mg溶菌酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀5-10次后放37℃保温至少30分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，需要自己根据不同的细菌摸索)。
2.12,000rpm室温离心10分钟，小心弃上清。
3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第2步。
细菌DNAout三、其他注意事项
1.可以直接使用细菌菌落提取DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到溶液A中，后续操作同上。
2.从单个菌落中提取到的DNA较少，所以只用30uL通用洗脱液洗脱。
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