BbvI限制性内切酶

特别提示：包括BbvI限制性内切酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：BbvI限制性内切酶
英文名称：BbvI Restriction Endonuclease
产品货号：SV0105
产品规格：1500U|300U|150U

在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
2,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
该酶切割产生一个 4 碱基的 5´突出端。
5´. . . G C A G C(N) 甘油浓度＞5% 条件下可能出现星号活性。

除了BbvI限制性内切酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：大片段Bst DNA聚合酶
货号：WE0236
规格：800U|4000U
  本品是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，其基因来源于Bacillus stearothermophilus，并在原始序列的基础上进行了部分点突变。该蛋白 具有5"→3" DNA聚合酶活性，无5"→3"和3"→5"核酸外切酶活性，具有强链置换活性。应 用于DNA等温扩增(LAMP)、多重置换扩增(MDA)、全基因组扩增(WGA)、建 库测序等。

名称：BsaBI限制性内切酶
货号：SV0155
规格：10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 75%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，60℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性20%。
甲基化敏感性:
对 dam 和哺乳动物 CpG甲基化敏感。
注意事项:
延时酶切条件下可能出现星号活性。

名称：BspHI限制性内切酶
货号：SV0213
规格：2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: <10%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度
10,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dam甲基化敏感。

名称：DdeI限制性内切酶
货号：SV0300
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：XmnI限制性内切酶
货号：SV0786
规格：5KU|1KU|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 50%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
被EcoRl 切割的位点经DNA聚合酶补平并平端连接后， 产生Xmn l的识别位点:GAATTAATTC。

名称：β葡糖基转移酶(T4噬菌体)
货号：JN0074
规格：500U
  本品能特异性地将尿嘧啶二磷酸葡萄糖(UDP-Glc)的葡萄糖单元转移至双链DNA的5-羟甲基胞嘧啶残基上，形成β-葡糖基-5-羟甲基胞嘧啶。T4噬菌体beta葡萄糖转移酶通过克隆了T4噬菌体bgt基因的重组大肠杆菌获得。
  本品对5-hmC残基的定向修饰来区分5-mC和5-hmC。这种酶可以将所有5-hmC糖基化，产生5-ghmC。这个反应是序 列无关的，因此所有5-hmC都将糖基化，而C或5-mC则不受影响。

产品用途：
1、糖基化DNA中5-羟甲基胞嘧啶。
2、免疫检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶。
3、通过与[3H]或[14C]-UDP-葡萄糖一起孵育将[3H]或[14C]-葡萄糖掺入到含有5-羟甲基胞嘧啶的DNA受体中，对5-羟甲基胞嘧啶残基标记。
4、通过核酸内切酶保护分析检测DNA中的5-羟甲基胞嘧啶。

基因组DNA中5-羟甲基胞嘧啶分析：

方案一
第1步：糖基化
基因组DNA用T4-BGT处理，让所有5-hmC糖基化，产生5-ghmC。这个反应是序列无关的，因此所有5-hmC都 将糖基化，未修饰或5-mC DNA则不受影响。
第2步：限制性内切酶消化
MspI和HpaII识别相同的序列（CCGG），但是对不同的甲基化状态敏感。HpaII只切割完全未修饰的位 点，胞嘧啶上的任何修饰（5-mC、5-hmC或5-ghmC）都阻碍切割。MspI则识别并切割5-mC和5-hmC，5-ghmC除外。
第3步：PCR分析
用引物扩增实验的靶DNA和对照的靶DNA。如果CpG位点含有5-羟甲基胞嘧啶，那么糖基化和消化之后检测 到条带，但是未糖基化的对照反应中没有。如果使用实时定量PCR，那么就可以估计这个位点大概有多少 羟甲基胞嘧啶。

方案二
TAB-Seq*


质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

活性定义：1 单位指能够保护 0.5 μg T4 bgt-DNA 免受 MfeI 限制性内切酶切割所需要的酶量。

10×反应缓冲液：50 mM Potassium Acetate，20 mM Tris- acetate，10 mM Magnesium Acetate，1 mM DTT， pH 7.9 at 25℃

贮存缓冲液：20 mM KPO4，200 mM NaCl，0.25 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.0 at 25℃

热失活：65℃，20分钟。