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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
Fowl Adenovirus(FAdVA)APCR
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1.禽腺病毒型PCR检测试剂盒图片即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
需要自备的器材:点击了解更PCR检测试剂盒。
1.禽腺病毒型PCR检测试剂盒图片仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
| 产品名称 | 禽腺病毒型PCR检测试剂盒图片 |
| 英文名称 | Fowl Adenovirus(FAdVA)APCR |
| 编号 | CP912924 |
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.禽腺病毒型PCR检测试剂盒图片 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
反应五要素:
禽腺病毒型PCR检测试剂盒图片参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
。 2)RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 具体操作:取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中,加入 800 μl Trizol 试剂,充分混合,裂解 10 min,12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3)反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒:适用于长片段 RNA(如 mRNA、LncRNA
文献中常用的分离外泌体的方法主要是超离法和试剂盒法,那这两种方法研究人员该如何选择呢?为了解决大家的疑惑,我们专门做了对比实验进行阐述。 四、超速离心法与试剂盒法比较 (一)实验分组和开展实验确定: 此实验共分为 3 组,每组设置 2 个重复,所选原始样本是 293T 细胞培养上清。 组1:超离法分离(UC-1,UC-2); 组2:使用某国外试剂盒 SXX(SXX-1,SXX-2); 组3:使用某国内试剂盒 UXX(UXX-1,UXX-2)。 开展
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开始后,并未观察到炎症细胞因子的任何显著差异。这些研究表明,在临床体外肺灌注的正常时间范围内,最低测试剂量 (1 mg/ml) 的 Azymes 可以有效地沿着灌注的人肺内皮细胞实现高度的 A 抗原去除。 图片来源:Sci. Transl. Med. 模拟 ABO 血型不相容(ABOi)的人肺移植 EVLP 模型 在确定了有效去除肺脏 A 抗原的条件后,研究人员随后建立了一个离体血浆再灌注模型来模拟和评估 A 抗原耗尽对预防或减轻 ABOi 移植中抗体介导的损伤的影响。 来自同一供体
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