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一氧化氮合成酶检测试剂盒

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  • 正旦国际
  • ZDK-003Z
  • 北京
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      NOS Assay Kit

    • 保质期

      6个月

    • 保存条件

      4℃

    • 供应商

      正旦国际

    • 库存

      大量

    • 规格

      50T


    一氧化氮合成酶(NOS)活性测定试剂盒说明书

    规格:50T

    该产品由军事医学科学院研发监制

    一、原理
    NOS催化L-精氨酸产生瓜氨酸和NO,瓜氨酸与氧合血红蛋白反应生成高铁血红蛋白,产生吸光度的改变。

    二、试剂
    1.磷酸钾缓冲液 100ml
    2.缓冲液A 40ml
    2.血红蛋白 20mg
    (实验前需将血红蛋白需称15.48mg倒入A液,搅拌溶解,如有杂质进行过滤,一次用不完可放入-20℃保存)
    3.B液 40ml
    4.C液 40ml
    (用前将标有NADPH的小管中固体全部倒入C液瓶中,搅拌溶解,可分装后-20℃保存)
    5.NADPH 11.96mg

    三、方法
    1. 制备组织匀浆: 取组织器官(组织需用生理盐水冲洗),加入40mMpH7.2磷酸钾缓冲液10-20%(W/V), 匀浆搅拌,离心10,000转/分20min,取上清液(D液)。
    2. 取A液0.8ml,C液0.8ml,D液0.6ml混合振荡,加入B液0.8ml,立即计时,振荡,比色。
    3. 比色
    1) 用双波长分光光度计:选择401nm和421nm,每隔30秒钟记录吸光值,计录到3min。
    2)如无双波长分光光度计,可用分光光度计,先用401nm测定一个样品,再用421nm测定另一个样品,计录时间应一致,同样每隔30秒计录吸光值,共计录到3min。
    注:A:用的光径为1cm比色杯。 B:对照用40mMpH7.2磷酸钾缓冲液。

    四、计算
    1. NOS活性单位表示法:每克组织每分钟产生一氧化氮量(nmol),即nmol/min每克组织。
    2. 计算公式:NOS活性=[(a-b)-(a’-b’)]×194.3
    a:30秒时的401nm处的吸光值   b :30秒时的421nm处的吸光值
    a’:90秒时的401nm处的吸光值 b’:90秒时的421nm处的吸光值
    注:每分钟吸光值可以任意选择时间间隔,但必须是1分钟。

    五、保存
    4℃保存,有效期半年。

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