- ￥46
- AMEKO
- 中国
- RC20111-100ML
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
100ml
本产品含0.05%胰酶和0.02%EDTA，经过滤除菌，可直接用于细胞及组织的消化。本货号不含酚红。
【特别说明】
胰酶-EDTA消化液（0.05%胰酶）因含有EDTA，消化能力明显强于胰酶细胞消化液（0.05%胰酶）。
对于酚红可能会干扰后续的测试分析，推荐选择不含酚红的胰酶-EDTA消化液（0.05%胰酶）和胰酶细胞消化液 （0.05%胰酶, 不含EDTA）。
对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时，推荐选择不含EDTA的胰酶细胞消化液（0.05%胰酶，不含EDTA）和胰酶细胞消化液（0.05%胰酶, 含酚红，不含EDTA）。
对于胰酶特别敏感的细胞，即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况，推荐选择胰酶细胞消化液（0.05%胰酶）或胰酶细胞消化液（0.05%胰酶, 含酚红）。
【使用方法】
一、贴壁细胞的消化：
（一）吸去培养液，用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，去除残余的血清。
（二）加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液，盖过细胞即可，37℃细胞培养箱放置 1~2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
（三）显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
（四）如果发现消化不足，可加入胰酶-EDTA 消化液重新消化。
（五）如果发现细胞消化时间过长，未及时吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1 分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
二、组织的消化：
（一）不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【注意事项】
由于组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况，确定最佳消化时间；消化细胞时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状况。
2、本产品需注意无菌操作，避免消化液被微生物污染。
3、不宜 4℃长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验液体配制：硼酸硼砂缓冲液：0.05M四硼化钠45ml，0.2M硼酸55ml，pH8.4；胰酶－EDTA消化液：胰酶－0.125g；EDTA－0.2g；D-Hanks平衡盐液定容至100ml所用的培养板、培养瓶或玻片预先经100μg/L多聚赖氨酸硼酸盐缓冲液于37℃包被4h，三蒸水洗三遍晾干备用。操作步骤如下：1、孕16d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，碘酒、75％乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜，无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2、在解剖显微镜下分离并取出胚胎
消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清终止，如果消化液中加入了edta的话，就要将消化液倒干净，如果细胞贴壁要求不是很严格的话，一般不需要进行离心。丁香园网友goodayellen的观点为：我也是刚做细胞培养不久，用的胰酶是0。05％胰酶＋0。02％EDTA，开始是消化细胞总是成团（计数严重不准）。现在消化基本都是单细胞悬液了，总结了一下经验：1，细胞千万不能长太满，80－90％就好（细胞刚刚基本成单层细胞，没有出现成层生长）2 用pbs洗两遍，加入消化液，镜下看出现细胞回缩，倒掉消化液（放置一会
种到新瓶子之前最好充分吹打，把细胞弄匀，否则传的细胞也呈现聚集的团，很难看。我的经验是消化液用EDTA加比较稀的胰酶，这样消化的细胞比较容易成单细胞悬液。 丁香园sir123的观点： 我目前已经养PC12一个多月了，经验谈不上很多，不过失败的教训倒是不少，可以拿出来和大家分享一下 1.细胞的培养基，我开始用10％FBS国产四季清的，DMEM，没加马血清和多聚赖氨酸什么的，因为条件关系，结果细胞贴壁性很好，生长速度还可以，3天1：2传代，在传到第5代时候，观察细胞状态下降，正常
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