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- 经科
- JK-110
- 国产
- 2025年12月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量现货
- 英文名：
Trypsin-EDTA Solution
- 保质期：
2年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100ml
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶（Trypsin）和 0.02%EDTA,不含酚红,Ca2＋和 Mg2＋。该消化液已用0.22 μm 滤膜过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化 1 分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
使用说明：
贴壁细胞的消化：
1、吸去培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置 30 秒至 2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液；加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
4、如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
5、如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
保存条件：
4℃保存；长期贮存于-20℃中；-20℃贮存下保存两年。
注意事项：
1、 在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2、 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
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文献和实验棕色小玻璃瓶，标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin) 配方：100ml PBS,0.25g胰酶 步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中，低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞
。4. 比色：选择 490 nm 波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。个人心得体会1. 细胞消化、接种数量：注意消化和数量，消化和数量，消化和数量（重要的事情说三遍）。从我个人的实验经验来看，这是重中之重。若消化出现问题，则会影响细胞的活性，进而影响 OD 值。对于 MDA-MB-231、MCF-7、HS-578T 等一系列容易消化的细胞，消化时胰蛋白酶中不添加 EDTA，消化时也仅需胰酶浸润数秒即可。然而，对于 SW480 等一系列难以消化的细胞，胰蛋白酶中需添加浓度为 0.25%
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