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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量现货
- 英文名:
Trypsin-EDTA Solution
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100ml
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶(Trypsin)和 0.02%EDTA,不含酚红,Ca2+和 Mg2+。该消化液已用0.22 μm 滤膜过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点,通常室温消化 1 分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
使用说明:
贴壁细胞的消化:
1、吸去培养液,用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
2、加入少量胰酶细胞消化液,略盖过细胞即可,室温放置 30 秒至 2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
3、显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来;此时吸除胰酶细胞消化液;加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
4、如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
5、如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
保存条件:
4℃保存;长期贮存于-20℃中;-20℃贮存下保存两年。
注意事项:
1、 在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2、 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100ml PBS,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
新批次细胞。 示意图4 结论: 细胞培养的核心在于“稳”。绝大多数增殖缓慢的问题,皆源于细节疏漏。把控好密度、体系、操作与代次四大关键,搭配合规稳定的培养产品,就能从根源减少细胞应激与状态波动,让细胞增殖稳定、实验结果可控。 中乔新舟胰酶产品 名称 货号 胰酶/EDTA消化液(浓度0.05%) CSP048 胰酶细胞消化液0.25% CSP045 胰酶细胞消化液0.25% CSP046 0.25%胰酶细胞消化液(不含EDTA,不含酚红
细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶(Trypsin),EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞
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