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- 单克隆抗体制备和纯化
- 上海
- 2026年01月31日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海万生昊天生物技术有限公司
- 服务名称：
单克隆抗体制备和纯化
- 规格：
次
我公司提供的单克隆抗体定制服务，经验丰富，客户遍布世界各大科研机构。抗原包括蛋白、多肽和小分子化合物。
针对单抗制备时间长风险大，我们将抗体制备分成免疫，融合，和亚克隆等若干阶段，并针对每个阶段收费。只有一个阶段完成并得到客户的认同，我们才进入到下一个阶段。如果失败，客户不承担任何费用。
单抗服务套餐
| 服务名称 | 目录号 | 服务特点 |
| 抗蛋白的单抗套餐 | MAB101 | 客户提供3-5mg免疫蛋白，免疫、融合、亚克隆； 最终提供2株细胞株和腹水及产品报告。 |
| 抗多肽的单抗套餐 | MAB102 | 客户提供蛋白序列，多肽合成、偶联、免疫、亚克隆； 最终提供2株细胞株和腹水及产品报告。 |
| 抗特殊位点单抗套餐 | MAB103 | 单克隆抗体将只在特殊位点发生反应。 相同序列的无特殊多肽将不会和抗体发生反应。 特殊位点包括：磷酸化、甲基化、乙酰化。 |
| 小分子化合物单抗套餐 | MAB104 | 客户提供小分子化合物，免疫、融合、亚克隆； 最终提供2株细胞株和腹水及产品报告。 |
单抗制备标准流程
| 时间（天） | 制备步骤 | 说明 |
| 1 | 初次免疫 | 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠，抗原与弗氏完全佐剂 |
| 14 | 第二次免疫 | 抗原与康为世纪水溶性佐剂 |
| 21 | 第三次免疫 | 抗原与康为世纪水溶性佐剂 |
| 28 | 血清效价检测 | 间接ELISA检测血清效价，效价达>1：20000；抗血清效价>1:10000再次加强一次，效价 <1:10000终止合同 |
| 30 | 加强免疫 | 单独抗原 三天后采血(血清做阳性对照)，取脾 |
| 34 | 细胞融合 | SP2/0骨髓瘤细胞与一只小鼠（ELISA效价较高）的脾细胞融合 |
| 44-56 | HAT选择杂交瘤细胞 | ELISA效价检测筛选阳性细胞克隆（一株） |
| 60-70 | 细胞上清送检 | 2ml ELISA阳性细胞上清交客户检测，请在接到样品后1周之内回复 |
| 细胞冻存 | 待客户检测结果结束，确认1株细胞株进行后续的腹水制备 | |
| 制备腹水并纯化 | 接种细胞制备腹水及腹水纯化（1株） | |
| 最终提供 | • 2株杂交瘤细胞，T-25细胞培养瓶1瓶 • 1株细胞Protein A/G纯化抗体2mg • 完整的技术服务报告 • 抗体验收标准：免疫原检测抗体效价 >1:50000 |
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文献和实验1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
单克隆抗体。 （2）体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗体的生产量。 杂交瘤细胞融合后，要进行筛选后才能使用。杂交瘤细胞分为两次：一、筛选出杂交瘤细胞;二、在初选的杂交瘤细胞中筛选出能产生特异性抗体的杂家瘤细胞，这两次筛选的方法和原理各不相同。 7. 腹水制备及单抗纯化
【实验 目的 】 ⒈ 加深对抗体基本知识的了解。 ⒉ 了解多克隆抗体的制备及纯化的基本方法。 ⒊ 了解免疫电泳的基本过程和实验依据。 一、多克隆抗体的制备 【实验 原理 】 当将抗原注射入实验动物体内时，一系列抗体生成细胞会不同程度的与抗原结合，受抗原刺激后在血液中产生不同类型的抗体，这种由一种抗原刺激产生的抗体称为多克隆抗体。多克
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