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单克隆抗体/杂交瘤细胞定制服务
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艾柏森(北京)生物科技有限公司
单克隆抗体/杂交瘤细胞定制服务
杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的免疫动物脾细胞(如小鼠B淋巴细胞)和具有永生功能的肿瘤细胞(如小鼠骨髓瘤细胞)。被特异性抗原免疫的免疫动物脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体能够分泌产生结合抗原特定位置(表位)的抗体,但其自身不能在体外连续培养,具有永生功能的肿瘤细胞(骨髓瘤细胞)则可在培养条件下无限分裂、增殖,即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有由一个B淋巴细胞与一个骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞才能具有持续培养的能力,形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。理论上,我们认为一个免疫后的B淋巴细胞只分泌产生一种抗体,而一个杂交瘤细胞只包含一个B淋巴细胞,所以增值后的杂交瘤细胞均来自一各克隆,因此产生的抗体就是单克隆抗体。
本公司提供全方位的抗原分析服务,为每一位客户精心打造的方案,全面评估实验风险,提出最合理的实验建议。无论是采用多肽设计合成,还是原真核蛋白表达目的抗原,我们一流的抗体制备技术团队都会深入每个实验细节,凭借多年的试验项目经验,有效规避实验风险,切实提高成功概率。免疫受试动物,均为SPF级饲养环境培育,遗传背景清楚,免疫应答迅速,抗体的专一性与结合力均为同行内首屈一指。实验技术人员全部具有研究生以上学历,全部熟稔大规模抗体杂交瘤细胞筛选技术流程,能根据客户的各种需求改进制备工艺。凭借业内领先的制备工艺,高于同行的免疫动物数量,我们拥有业内最深的杂交瘤细胞群探测深度与精准度,通过快速筛选,我们制备的抗体不仅能实现WB,ELISA等常规实验需要,对于客户需要的更高制备难度的IHC、IF、IP等试验,同样可以有效检出满足要求的功能性杂交瘤细胞。
犬单克隆抗体制备(Canine Monoclonal Antibody Service)
犬科动物经常被用于恶性、感染、炎症和自身免疫疾病的模型动物,尤其是一些消化系统疾病模型。凭借噬菌体展示技术丰富的实验经验与技术积累,艾柏森生物公司已成功建立了针对数种抗原的犬免疫抗体库,并有过成功利用大规模淘洗筛选技术获得高亲和力犬单抗的经验。制备的抗体可实现生物医学方面的广泛应用。
但是在某些情况下,由于抗原自身的一些特殊原因,比如免疫原性地或者有毒性,是的抗体制备走免疫途径面临很大的困难,这个时候,我们在犬抗体库方面的知识积累就可以发挥很大的用途,通过构建抗体轻重链框架结构,在针对特定抗原进行位点修饰,实现抗体的生产过程全人工化。但是这种方法涉及到抗原与抗体构型的空间结构分析预测,实施难度很大,技术要求很高。
除了犬源单克隆抗体制备服务,我们还提供包括犬源化、鼠源化和人源化抗体改造技术服务。
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文献和实验1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交瘤细胞既可产生抗体,又可无性繁殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体,由于每种抗原都有几个抗原决定簇,用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体,即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
1. 杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。2. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
一、实验目的: 单克隆抗体制备是细胞免疫学的一个重要里程碑,它涵盖了细胞培养、细胞融合、免疫动物和抗体效价检测等各个方面内容。了解单克隆抗体制备的原理、主要步骤和方法。 二、实验原理: 骨髓瘤细胞在体外培养能大量无限增殖,但不能分泌特异性抗体;而抗原免疫的B淋巴细胞能产生特异性抗体,但在体外不能无限增殖。将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合后形成的杂交瘤细胞,继承了两个亲代细胞的特性,既具有骨髓瘤细胞能无限制增殖的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。经在HAT培养
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