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- 百奥莱博
- KFS242-CGF
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
268
- 英文名：
5×Proteinase K
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格：
40μl
特别提示：包括50×蛋白酶K在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：50×蛋白酶K
英文名称：5×Proteinase K
产品货号：KFS242
产品规格：40μl
Proteinase K，中文名为蛋白酶K。不含DNase，不含RNase，进口分装，可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验，例如基因组DNA 抽提、酶的消化去除等。
酶活力>30U/mg。在37℃，以血红蛋白为底物，1 分钟内可以产生相当于1 微摩尔酪氨酸Folin 阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K 的量，定义为一个单位蛋白酶K 酶活力。
在很宽的pH 范围内有效，有效的pH 范围为pH4.0-12.5，zuì佳pH 范围为pH7.5-8.0。
蛋白酶K 的zuì佳反应温度为65℃，但在65℃或更高的温度蛋白酶K 自身的也非常迅速地降解。很多时候反应温度选择50-55℃。
在0.2-1%SDS 或约10mM 尿素存在的情况下，蛋白酶K 显示更高的酶活性。蛋白酶K 的常用工作浓度为0.05-1mg/ml，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH 是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween-20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K 的活力影响不大。
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与 TritonX100 等细胞通透剂。 2. 蛋白酶K一般工作液浓度为 20 μg/ml,亦可自行将浓缩液配制1-10 mg/ml。蛋白酶K可用 PBS 配制，也可用蛋白酶K缓冲液(100 mM Tris HCl pH8.0, 50 mM EDTA)，分装后-20ºC保存。 3. 蛋白酶K反应时间一般为10-30 min，具体时间长短与切片厚薄有关，4 μm左右的片子可以通透 10 min，如切片厚度30 μm左右的可延长至30 min，需实验摸索最佳时间。通透时间过长易脱片、过短起不到通透效果。 四
%，70%，50%，30%各5min。入PBS（含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3～7.4）10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 （3）50℃2×SSC，含5mmol/l EDTA溶液中30min。 （4）蛋白酶K（1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中，）37℃20～25min。 （5）0.2mol/l 甘氨酸液：室温10min，中止蛋白酶反应。 （6）4%多聚甲醛（PBS新鲜配制）：室温20
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