染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)

特别提示：包括染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)
英文名称：Chromatin Immunoprecipitation(ChIP)Assay Kit

产品货号：染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒)
产品规格：22次

本试剂盒用于通过免疫沉淀来沉淀和目标蛋白结合的染色质片段，最后通过PCR或Southern等方法来检测沉淀的染色质片段的试剂盒。通常用于检测特定的转录因子或组蛋白等基因组DNA结合蛋白是否和预期的特定基因组DNA序列在同一复合物中。

通过ChIP检测可以获得在体的(In Vivo)目标蛋白和预期基因组DNA片段是否在同一复合物中的结论。EMSA，也称gel shift获得的结果是体外的(In Vitro)目标蛋白和预期基因组DNA片段的结合结果，可以推断细胞内也发生类似的结合，但并不代表该情况在细胞内也真实发生。而ChIP的检测结果则可明确说明这种结合在细胞内是真实发生的。

本ChIP Assay Kit采用了Protein A+G Agarose，比Protein A Agarose或Protein G Agarose适合于免疫沉淀更多种类的抗体，包括mouse IgG1，IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, rat IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG2c, rabbit IgG, rabbit and goat polyclonal Abs，以及human IgG1, IgG2, IgG3和IgG4。

本试剂盒中经过Salmon Sperm DNA预饱和的Protein A+G Agarose和目的基因组DNA的非特异性结合大大下降。

提供了预混合的对照引物(Control Primers)。可用于扩增human GAPDH的部分相应序列，引物序列为：
5"-TACTAGCGGTTTTACGGGCG-3"；
5"-TCGAACAGGAGGAGCAGAGAGCGA-3"

本ChIP Assay Kit如果用于常规的染色质免疫沉淀，共可以免疫沉淀22个样品。

产品组份：
Protein A+G Agarose/Salmon Sperm DNA————3ml
Glycine Solution(10X)————————————30ml
ChIP Dilution Buffer————————————48ml
Low Salt Immune Complex Wash Buffer————24ml
High Salt Immune Complex Wash Buffer————24ml
LiCl Immune Complex Wash Buffer——————24ml
TE Buffer—————————————————48ml
0.5M EDTA—————————————————250μl
5M NaCl——————————————————500μl
1M Tris, pH 6.5——————————————500μl
SDS Lysis Buffer—————————————10ml
Control Primers(5μM each)————————0.1ml

储存条件：4℃避光，有效期一年。

除了染色质免疫沉淀检测试剂盒(ChIP检测试剂盒),，我公司还供应以下相关产品：



名称：Alexa Fluor 555抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
货号：YT113
规格：>300次
本试剂盒含有Alexa Fluor 555标记的驴抗小鼠IgG(H+L)抗体，可以用于检测小鼠来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Alexa Fluor 555是一种常用的非常明亮的红色荧光探针。它比绝大部分常用的红色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。Alexa Fluor 555的荧光光谱和Cy3非常接近。Alexa Fluor 555的吸收峰555nm、发射峰565nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗小鼠Alexa Fluor 555 —————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：封闭蛋白PBS缓冲系统封闭液(干粉)
货号：ZN1913
规格：1包
产品保存：4℃保存，半年有效
产品特点：
1.相容性好，可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比，背景更干净。

名称：酪蛋白TBS缓冲系统封闭液
货号：ZN1918
规格：500ml
产品保存：4℃保存，一个月有效
产品特点：
1.相容性好，可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比，背景更干净。

名称：酪蛋白TBS缓冲系统封闭液(干粉)
货号：ZN1919
规格：1包
产品保存：4℃保存，半年有效
产品特点：
1.相容性好，可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比，背景更干净。

名称：蛋白印迹膜再生液
货号：ZN1923
规格：100ml
产品保存：4℃保存，一年有效
产品说明：
蛋白印迹膜再生液，用于免疫印迹中转移了蛋白后膜的重复利用。在免疫印迹中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测表达量相对稳定的内参蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用蛋白印迹膜再生液中特殊成份解离一抗二抗与印迹膜上抗原的结合从而去除一抗二抗，即可非常方便地重新利用同一张膜检测其它蛋白。与重新跑一个 SDS-PAGE 胶比较，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。
产品特点:
1.不含有常用的beta-巯基乙醇，室温下使用，可对同一膜进行 5次以上的免疫印迹检测.
2.独有的配方，效力强，对蛋白作用温和。
使用方法：
1.用 TBS-T 将膜洗10分钟×3次，将膜充分浸泡于适当体积再生液中，摇床震荡室温孵育30－60分钟(孵育时间视具体情况而定，表达量高的蛋白可适当延长时间，表达量低的蛋白可减少时间)。
2.用镊子取出膜，用 TBS-T洗涤缓冲液快速淋洗膜一次，然后洗膜 5-10分钟。
3.此时膜上结合的抗体己被洗脱，可重新封闭，进行下一轮抗体孵育。
注意事项：
1.刚从冷冻保存中拿出来会出现 SDS的沉淀，建议温水溶解再使用。
2.建议先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白。
3.本品适用于 NC 膜和 PVDF 膜，推荐使用 PVDF 膜，效果更佳。
4.不推荐用于 BSA 封闭的印迹膜以及 DAB,NBT/BCIP 显色的印迹膜。
5.请佩戴手套操作。

名称：双显色抗小鼠IgG免疫组化试剂盒(POD和FITC)
货号：ZN2938
规格：1ml|2ml|5ml
本试剂盒适于一抗来源为小鼠的IgG类抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 FITC 及过氧化物酶 POD 标记的链酶亲和素（SABC-FITC+SABC-POD）。FITC 在 490-495nm 激发，在 520-530nm 发射荧光，在荧光显微镜下呈明亮黄绿色。SABC-POD 在加入显色底物 DAB 显示后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。

试剂盒组成：

组分	规格
正常山羊血清封闭液(稀释比1:10)	1ml/2ml/5ml
生物素化山羊抗小鼠IgG(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-FITC(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-POD(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml

另附有四个滴瓶可供稀释试剂用。

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性，PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭：滴加用稀释后的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(小鼠IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，37℃孵育30分钟。PBS 冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-FITC(参考效价1:100)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。

建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。