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文献和实验刚开始养SK-BR-3时,细胞状态不是很好,贴壁也不均匀,于是开始想办法,考虑是不是吹打的不够,或是传得过多,或是其它的什么,后来发现的确如此,细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。我的传代方法是:以50平方厘米培养瓶为例,待细胞长满瓶底70%-80%1 、吸除或倒掉瓶内旧培养基。2 、PBS 5ml加入培养瓶,轻轻晃动培养瓶,让PBS流遍细胞表面,倒掉。3 、PBS 5ml加入培养瓶重复洗一次,倒掉。4 、加入1ml胰蛋白酶消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,然后置37度
网络 二、其他突变品系 经过长期选育,还培育出很多其它突变品系动物,如无T细胞小鼠,无B细胞小鼠,无T、B细胞小鼠,无K细胞小鼠,无T、B、K细胞小鼠,无巨噬细胞小鼠,无毛大鼠,无毛豚鼠,无毛兔(但有胸腺),BN(Brown Norway)棕色小鼠,Long Evans头部毛斑如包头巾、基因型为hh的大鼠和基因型hhaa、尾基部有黑色毛的大鼠
denatured DNA 5µl 10x biotinylated dNTP stock (BIOPRIME reaction kit) 20µl 2.5x buffer solution (BIOPRIME reaction kit) 14µl ddH2 O 1µl Klenow enzyme (BIOPRIME reaction kit) (c) incubate at 37o C for 3 hours (d) stop reaction by heating
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