植物基因组DNA高效提取试剂盒

特别提示：包括植物基因组DNA高效提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物基因组DNA高效提取试剂盒
英文名称：High efficiency extraction kit for genomic DNA from Plant
产品货号：WH0001
产品规格：50次|200次

本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的裂解缓冲液系统，能够高效提取多种不同植物组织中的基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，高效、专一吸附DNA，可zuì大限度去除杂质蛋白。独特的裂解缓冲液可以高效裂解植物细胞，zuì大限度的保护DNA的完整性，提高基因组DNA浓度。提取的基因组DNA片段大，纯度得率高，质量稳定可靠。提取的基因组DNA适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、高通量测序，芯片杂交以及Southern杂交等下游实验。

试剂盒特点：
1．简单快速：1小时内即可获得超纯的基因组DNA。
2．应用广泛：适用于各种植物组织。
3．超纯高效：高效获得的DNA纯度高，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

试剂盒组成：

组分	50T	200T
缓冲液FGA	40ml	160ml
缓冲液LP2	10ml	40ml
缓冲液LP3	21ml	84ml
漂洗液PW	15ml	50ml
洗脱缓冲液TB	15ml	60ml
RNase A（10mg/ml)	300μl	1.25ml
吸附柱CB3	50个	200个
收集管（2ml)	50个	200个

保存条件：室温（15-30℃)干燥条件下可保存12个月；更长时间的保存可置于2-8℃。在2-8℃保存条件下，若产生沉淀，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2．缓冲液FGA可能发黄，并不影响提取效果。
3．若缓冲液FGA或LP2有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。
4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。

使用方法：
使用前请先在缓冲液LP3和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1．处理材料：
  取植物新鲜组织100mg或干重组织20 mg，加入液氮充分碾磨。加入400μl缓冲液FGA和6 μl RNase A（10 mg/ml），旋涡振荡1 min，室温放置10min。
 
2．加入130 μl缓冲液LP2，充分混匀，旋涡振荡1 min。
3．12000rpm（~13400×g）离心5 min，将上清移至新的离心管中。
4．加入1.5倍体积的缓冲液LP3（例如500 μl的滤液加750 μl缓冲液LP3) （使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，立即充分振荡混匀15 sec，此时可能会出现絮状沉淀。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm（~13400×g）离心30 sec，倒掉废液，吸附柱CB3放入收集管中。
6．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12,000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
  注意：如果吸附柱膜呈现绿色，向吸附柱CB3中加入500 μl无水乙醇，12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7．重复操作步骤6.
8．将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm （~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等)实验。
9．将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TB，室温放置2-5 min，12000rpm（~13400×g）离心2 min，将溶液收集到离心管中。
  注意：为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室温放置2min，12000rpm（~13400×g)离心2 min。洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

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