蓝色预染蛋白Marker（18～94kDa)

特别提示：包括蓝色预染蛋白Marker（18～94kDa)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：蓝色预染蛋白Marker（18～94kDa)
英文名称：Pre-stained Protein Marker（18kDa～94kDa)
产品货号：WH0175
产品规格：20次（100μl)

本制品为几种蛋白质分别纯化预染后混合而成的蛋白质溶液，这些蛋白混合物与蓝色或彩色染料共价偶联，可在凝胶电泳时出现强度均匀的蛋白带，可以直接观察蛋白电泳及判断Western转移效果。同未预染的蛋白标准相比，预染蛋白Marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变。如果要精确判定分子量，推荐将我公司的非预染蛋白质Marker（目录号：WH0177）与预染蛋白Marker配合使用。本制品适合于12%-15% SDS-PAGE电泳。无需加热，直接上样，使用更方便。本制品中每种蛋白约0.2-0.3μg/μl。



贮存液成分：30mM Tris-HCl（pH7.5)；10mM EDTA；33％甘油；2％ SDS

附：
1× SDS-PAGE buffer：3.0g Tris.base（25mM)，18.8g Glycine（250mM)，1g SDS，用ddH2O定容至1L。
1× Transfer buffer（干转)：5.8g Tris.base（48mM)，2.9g Glycine（39mM)，0.37g SDS，20％*醇，用ddH2O定容至1L。

保存条件：短期内多次使用置于4℃，-20℃保存一年。

使用方法：
使用前请将其置于室温或37-40℃数分钟，彻底溶解并震荡混匀后使用（请不要煮沸）。取10μl加入到凝胶（1mm厚mini-gel)孔内；若加样孔较大，可适当增加其用量。适用于蛋白质凝胶电泳和蛋白质转膜等（从PAGE胶转移到NC膜或PVDF膜上）实验。

电泳条件：
凝胶浓度为12-15％ SDS-PAGE，120-200 V电泳30-50min（Mini电泳装置）。

注意事项：
1．电泳时间过长将导致蛋白条带发散现象。
2．不适合低电压长时间（过夜)转膜。

除了蓝色预染蛋白Marker（18～94kDa),，我公司还供应以下相关产品：



名称：SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)
货号：YT052
规格：2ml
本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，6倍浓缩的蛋白上样缓冲液，可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。

注意事项：
1. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
2. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)必须完全溶解后再使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。


名称：抗体孵育膜
货号：SNM407
规格：100张/包

名称：定影粉
货号：SNM420
规格：10×250ml

名称：彩色预染超低分子量蛋白Marker(1.2～45kD)
货号：RFT043
规格：10T(50μl)
本蛋白Marker可以直接观察蛋白电泳及清晰判断Western Blotting的转膜效果。本产品包含3种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为1.2kD-45kD，分子量大小为 1.2kD，4.6kD，10kD，16kD，27kD，45kD (注：蛋白大小已在18%Tricine-SDS-PAGE中用非预染蛋白Marker标定过。



储存条件：-20℃。

名称：NF-κB p65蛋白检测试剂盒
货号：KFS236
规格：50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究（本试剂盒包含兔抗NF-κB p65抗体），但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。

名称：免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
货号：SY0319
规格：100ml
本品WB/IP裂解液，是一种非变性条件下的裂解液，可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100，不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂，裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。

注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3）如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测，需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线，如无显著影响，则可继续使用。
4） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

(一) 细胞样品
1）融解WB/IP裂解液（无抑制剂），混匀。取适当量的裂解液，根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。因为大团细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子检测等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解WB/IP裂解液（无抑制剂），混匀。取适当量的裂解液，根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
3）按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。