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- 百奥莱博
- WH0135-GKB
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
107
- 英文名：
Methylation-specific PCR Kit
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
400U
特别提示：包括甲基化特异PCR试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：甲基化特异PCR试剂盒
英文名称：Methylation-specific PCR Kit
产品货号：WH0135
产品规格：400U
本制品是特别针对通过PCR方法研究基因组DNA甲基化特点的客户所开发的试剂盒。试剂盒组分简单，包含MSP DNA Polymerase，10×MSP PCR Buffe和dNTPs。其中，MSP DNA Polymerase是采用抗体修饰的耐热聚合酶，10×MSP PCR Buffer是特别为MSP反应所优化的PCR缓冲液。本产品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。适于与我司重亚*酸盐处理试剂盒（WH0232）搭配使用。
表观遗传学是研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下，基因表达和调控的可遗传变化的一门遗传学分支学科。表观遗传的现象很多，比如RNA介导的基因沉默、组蛋白修饰等。在高等真核生物中一个主要的表观遗传学机制是DNA的甲基化。
产品组成：
| MSP DNA Polymerase（2.5U/μl) | 400 U |
| 10×MSP PCR Buffer | 1ml |
| dNTPs（2.5mM) | 1ml |
储存条件：-20℃可保存12个月
质量控制：
SDS-PAGE检测纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
使用说明：
本产品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量MSP DNA Polymerase，10×MSP PCR Buffer和dNTPs，同时加入模板和引物，并加入ddH2O补足体积，使MSP PCR Buffer的浓度为1×即可进行反应。
适用范围：
本产品适用于甲基化特异性PCR（MSP）方法分析基因组DNA的甲基化特点。
反应举例：
注意：以下举例仅供参考，实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定zuì佳反应条件。
1．使用甲基化特异性PCR试剂盒，以重亚*酸盐处理后的基因组DNA为模板，扩增400 bp的片段，反应体系为20μl。
| 成分 | 使用量 |
| Template | ＜500ng |
| Primer 1（10μM） | 1 μl |
| Primer 2（10μM） | 1 μl |
| dNTPs （2.5mM） | 1.6 μl |
| MSP DNA Polymerase（2.5U/μl） | 1 U |
| 10×MSP PCR Buffer | 2 μl |
| ddH2O | 补至20μl |
2．PCR反应循环的设置：
3.结果检测：反应结束后取10 μl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。
注意：反复冻融的DNA模板会影响扩增，尽量不要反复冻融DNA模板进行；如需多次实验，可分装后进行冻存，减少冻融次数。
除了甲基化特异PCR试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN80205 | DMSO，PCR级 | 1.5mL |
| BTN130308 | 一管式双链cDNA合成试剂盒 | 10次 |
| BTN91202 | 双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) | 50次 |
| YT374 | DNA聚合酶(高保真)(高效率)(双平端克隆) | 200U|1000U |
| YT391 | dNTP混合溶液(25mM) | 250μl |
| YT400 | 核酸酶清除剂(核酸酶喷雾清除剂) | 250ml |
| WE0127 | 全血Taq DNA聚合酶 | 2500U |
| WE0135 | SuperSYBR Mixture(高含量ROX校正染料) | 5ml |
| WE0146 | 实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(高含量ROX校正染料) | 5ml |
| ALH207 | 植物直接PCR试剂盒(无需提取DNA) | 100次|500次 |
| RFT091 | 2×GC Buffer | 1ml|5×1ml|10×1ml |
| JN0002 | 第一链cDNA合成试剂盒 | 50次|100次 |
| JN0035 | 2×RoomTop Taq PCR MasterMix | 1ml×5 |
| JN0038 | 2×Hot Start Taq PCR MasterMix | 1ml×5 |
| JN0058 | 热稳定单链DNA结合蛋白 | 50μg |
| QN0947 | SYBR Green I(PCR级，10000X) | 50μl|100μl|1ml |
| QN0970 | 2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料) | 1ml|5ml |
| GL1302 | Taq稀释缓冲液 | 100ml |
| QN2094 | 随机引物 | 20ug |
| QN2095 | 2×PCR Mastermix(SYBR Green) | 50T|200T |
| WH0087 | 超纯dCTP溶液（100mM) | 0.5ml |
| WH0112 | HRM分析试剂盒（染料法) | 20μl×125次|20μl×500次 |
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文献和实验。如果你没有足够的 C 位于非 CpG 内，那么未转化的 DNA 和甲基化的 DNA 看上去会差不多，以 6～7 个 CpG 为理想。如果低于这个，那么特异性会降低。你会得到非特异性的扩增，因为它区分度不够。让产物短一点亚硫酸氢盐转化的过程会损伤模板 DNA，因此尝试扩增较小的片段（小于 150 bp），将得到最佳的结果。如果你通过电泳来运行产物，那么确保你能够将 M 引物的产物与 U 引物的分开。遵守 PCR 的原则 PCR 引物设计的所有原则也适用于 MSP。1）引物的退火温度要相当
1. MSP原理：MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA，未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变，然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳，凝胶扫描观察分析结果。 此原理的关键在于3对特异引物的设计。引物序列设计在富含胞嘧啶区域以区别亚硫酸氢钠处理后转化的非甲基化的DNA与未转化的甲基化的DNA，在引物的3’端，至少含有3个CpG位点，以保证区别甲基化与非甲基化DNA
甲基化特异PCR 关键词：甲基化特异PCR、DNA甲基化、Methylation-specificPCR、甲基化特异PCR文献、甲基化特异PCR引物设计、甲基化特异PCR实验注意事项 第一部分：甲基化特异PCR文献 第二部分：实验 第三部分：甲基化引物设计 第四部分：实验注意事项 一、亚硫酸氢钠修饰过程中可能出现的问题及应对措施 亚硫酸
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
