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999
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联硕生物
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1g

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文献和实验与蛋白充分结合.其实加热不是问题的关键,比如上述的Reynolds等人制备SDS-protein样品的方法是用先用盐酸胍处理,以得到蛋白多肽的无规卷曲构象(random coil conformation)然后用含SDS与巯基乙醇的缓冲液进行透析,文中还指出,若是省去盐酸胍这一处理步骤,直接将蛋白用含SDS与巯基乙醇的缓冲液进行透析能得到一样的结合率(约1.4g/1g),同样在Reynolds的另一篇文献中(THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY,1970,245
SDS-PAGE/蛋白转印/western Blot等实验中试剂配制
Catalog-N1和《分子克隆》二版P924) 4. 30% SDS1.称量10 g 高纯度(电泳级)的SDS置于100~200 ml烧杯中。2.加入约800 ml去离子水 ,68oC加热溶解。3.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。4.定容至100 ml,室温保存。(参照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924)
SDS-PAGE,蛋白转印,western Blot试剂配制
ml去离子水,68oC加热溶解。3.滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。4.定容至100 ml,室温保存。(参照kara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924)10% 过硫酸铵1.称量1 g过硫酸铵。2.加入约10 ml去离子水后搅拌溶解。3.储存于4oC。注意:10%过硫酸铵溶液在4oC保存时可使用两周左右,超过期限会失去催化作用。(参照Takara公司Catalog-N1和《分子克隆》二版P924) 1×SDS凝胶加样缓冲液50 mmol/L Tris•Cl (pH 6.8)100
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