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中科亚光
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*标准肽:链长至 100个氨基酸,毫克至克级,纯度最高可达99%。
*不同纯度范围:粗肽、脱盐、>75% 、> 85% 、>90%、>95%、>98%、>99%。
*常规修饰肽:乙酰化,酰胺化,生物素标记肽,磷酸化肽,D型氨基酸修饰肽等。
*特殊修饰肽:磺酸化肽(Sulfated-tyrosine),环肽(二硫键环化,首尾环化),荧光标记肽(FITC,Dabcyl/Edans,Dansyl,FAM,Abz/Dnp,Rhodamine等),甲基化多肽(Lys(Me2),Lys(Me),Lys(Me3),Arg(Me),Arg(Me2) -Symetrical,Arg(Me2) –Asymetrical),同位素标记肽(Heavy Isotope Labeled Peptides)、拟肽(peptoid)和点击化学用多肽(Peptides for Click Chemistry)。
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*药用肽,大批量肽。 *抗原多肽及其与蛋白的交联:KLH,BSA, OVA, HEL。 |
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文献和实验前言自从1963年MERRIFIELD发展成功了固相多肽合成(SPPS)方法以来,经过不断的改进和完善,到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无法比拟的优点。固相合成的主要设计思想是:先将所要合成肽链的羟未端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连,然后以此结合在固相载体上氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基保护基,并同过量的活化羟基组分反应接长肽链。重复(缩合-洗涤-去保护-中和和洗涤-下一轮缩合)操作,达到所要合成的肽链长度;最后将肽链从树脂
合成的理论来讲主要就是把氨基酸按一定的顺序排列起来,利用氨基和羧基的脱水形成肽键,进而形成我们所需要的结构。为了避免副反应的进行,我们需要事先把不需反应的氨基进行保护,使它们在合成过程中不会参与反应,从而避免副产物的生成。否则,一般羧基活化方法使反应活性提高的同时总伴随着反应选择性下降;反之,选择性虽然改善,但反应活性则又不够。因此,肽合成的根本问题是氨基的保护问题。合成多肽可以通过溶液相和固相方法。固相合成比液相合成更有优势, 两种方法都有一些优点和缺点。
多肽合成概述: 1963年,R.B.Merrifield[1]创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上,然后在此树脂上依次缩合氨基酸,延长肽链、合成蛋白质的固相合成法,在固相法中,每步反应后只需简单地洗涤树脂,便可达到纯化目的.克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难,为自动化合成肽奠定了基础.为此,Merrifield获得1984年诺贝尔化学奖. 今天,固相法得到了很大发展.除了Merrifield所建立的Boc法(Boc:叔丁氧羰基)之外,又发展了Fmoc固相法
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