GELoader®凝胶上样吸头 0030001222

NuPAGE® 凝胶试剂帮你解开电泳误区

相关专题   误区：凝胶试剂总是修饰我的蛋白 事实：NuPAGE® 凝胶试剂实际上保护了您的蛋白 更中性pH是关键 tris-甘氨酸凝胶系统的根本缺点是样品制备过程中的蛋白降解。在使用pH 6.8的tris-甘氨酸样品缓冲液时，样品在缓冲液中加热，因tris-甘氨酸的负温度系数导致pH值下降。这最终导致蛋白水解。 NuPAGE® 凝胶试剂通过维持较高的样品缓冲液pH值，保留了蛋白样品的完整

这些蛋白质互作实验方法，你都了解吗？

其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11：使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子，而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行，在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白，从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白，然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析，从而确认互作

蛋白分离的不连续缓冲系统的比较

（-），由胶缓冲液提供，由于相对于系统中其它的阴离子，阳极对它具有最高的吸引，因而充当先导离子。b)甘氨酸(-)，电泳缓冲液提供的主要的阴离子，由于在一个带电的环境中，它仅仅部分带有负电荷，并且保持在带有更高电荷的氯离子的后面，充当后随离子。c)Tris碱（+），出现在胶和电泳缓冲液中的共同的离子，在电泳时，Tris-Glycine系统中凝胶和缓冲液的离子形成了胶分离区域的9.5的工作pH值。图1 Tris-Glycine SystemNuPAGE® Bis-Tris系统（图2）的情况，主要包括三种离子