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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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20
- 英文名:
Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
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| 产品名称 | 鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书 |
| 英文名称 | Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR |
| 编号 | FS-P1001 |
准备物品
鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
注意事项
1.鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素
鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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林可霉素单克隆抗体 小鼠单抗 0.2
技术特点:
1鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒说明书准确可靠,临床双盲对照试验>1000例,结果与金标准测序法比对,结果一致性大于99%。
2高灵敏:可检测低至10ng的人基因组DNA。
3快速:整个检测流程只需3小时。
4简便:试剂盒提供预混好的试剂,使体系配置操作简便。
5防污染
6高特异性:双重特异性组成,保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对,才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对,在延伸中产生荧光。
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
%;2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA(按照基因组 DNA 提取试剂盒的说明书操作);3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增,这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase,一切按照该酶的说明书严格操作;4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂盒回收 DNA 条带,一切按照胶回收试剂盒说明书进行操作;5. 回收后的 DNA 样本,经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA,部分结果如下:T7 EI验证成功,开始正式实验时间飞逝,上次说
,支原体DNA会显示为特异性条带,以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体,但谨慎起见最好同时使用另一种检测方法来进行验证。 普健生物生产的支原体PCR检测试剂盒(Mycoplasma PCR Test Kit)是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s-rRNA 基因保守区域片段进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis, M
与SafetyTector™ S孵育后,均不再检测到感染性。 分析性能评价 除了对使用者安全之外,强大的分析性能对诊断试剂盒的开发和验证也是必不可少的。选择合适的稀释液对性能至关重要。分析潜在感染样本的一个挑战是如何产生病毒灭活效果但不干扰抗原-抗体相互作用而导致错误结果。CANDOR 在开发区SafetyTector™ S的过程中实现了这种平衡。在德国联邦药物和医疗器械研究所(BfArM)列出的市售快速抗原测试中,通过用SafetyTector™ S替换各自提供的稀释和提取缓冲液来研究分析性能。在这些不同
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