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- 上海羽朵
- 上海
- YEF22956
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海羽朵生物科技有限公司
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
ELISA
- 规格：
48T
猪（Porcine）脂肪酸合成酶（FAS）ELISA检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被脂肪酸合成酶（FAS）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸合成酶（FAS）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品活性。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
- 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
- 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
- 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
- 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
- 灵敏度：最低检测浓度小于10 U/ml。
- 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
- 有效期：6个月
- 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
- 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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文献和实验Fas（CD95/APO-1）分子已被证实是一种细胞表面的受体，可与Fas配体（FasL）结合，介导细胞凋亡。本法利用抗－Fas－生物素通过蛋白印迹法、流式细胞分析或免疫组化染色检测Fas/Apo-1分子。 【样本来源】 (1) 单层粘附细胞； (2) 细胞悬液； (3) 组织切片细胞提取物。 【材料与试剂】（Roche公司试剂盒） (1) 鼠抗人－Fas-Biotin； (2) 封闭缓冲液： 0.1mol/L Tris
人Fas 配体(FasL) 酶联免疫分析（ ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中Fas 配体(FasL) 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人 Fas 配体 (FasL) 水平。用纯化的 人 Fas 配体 (FasL) 抗体 包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 Fas 配体 (FasL
人可溶性Fas 配体(SFasL) 酶联免疫分析（ ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中可溶性Fas 配体(SFasL) 的 含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人可溶性 Fas 配体 (SFasL) 水平。用纯化的 人可溶性 Fas 配体 (SFasL) 抗体 包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中
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