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55
- 英文名:
Tryptose Soya Broth
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详见说明书
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上海研生
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低温冷藏
- 规格:
250g
产品名称:大豆酪蛋白消化物琼脂培养基USP品牌
英文名称:Tryptose Soya Broth
产品规格:250g
产品用途:用于药品线无菌灌装试验用于药品线无菌灌装试验
产品图片:
【实验方法】
1.大豆酪蛋白消化物琼脂培养基USP品牌培养基阳性组:取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组:即空白对照,即不添加菌液。
3. 接种量计数:步骤1中的平皿中,细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基,霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.大豆酪蛋白消化物琼脂培养基USP品牌培养条件:
无菌检查:20~25℃培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)
MPN计数:30~35℃培养箱中培养3天
控制菌检查:30~35℃培养箱中培养18~24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30~35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20~25℃培养箱中培养3~5天
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培养基和使用常见问题:
1.大豆酪蛋白消化物琼脂培养基USP品牌低血清培养基能用肉眼判断其pH值吗?
答:低血清培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同,不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值,建议使用pH计进行测定。
2. 低血清培养基的缓冲系统是什么?
答:平衡盐一般是由无机盐及葡萄糖组成的。平衡盐有Hanks′系统、Earle′s系统、Dulbecco′s磷酸缓冲盐系统等。199系列培养基、MEM系列培养基均有Hanks′系统的培养基及Earle′s系统的培养基。但是有些培养基均不是以上常规的平衡盐系统,例如RPMI 1640培养基、F12培养基。MEM(SLM)低血清培养基的平衡盐系统也不是常规的平衡盐系统,该平衡盐系统的缓冲能力强于常规平衡盐系统的缓冲能力。
注意事项:
◆大豆酪蛋白消化物琼脂培养基USP品牌标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。ELISA实验标准曲线平直,一般有以下原因:标准曲线制备是否不当,洗孔不净,吸孔不充分,读数不准确或是吸量误差。查找原因,即可找到相应解决方案。
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文献和实验培养基凝固不充分或滑出平皿 原因:a. 顶层或底层培养基中琼脂粉含量低;b. 顶层培养基中加入的溶剂或待测物酸化,导致凝胶不充分;7、如何判断 Ames 实验结果是否为假阳性 将经受试物和阳性对照物处理的 Ames 菌落进行增菌培养后接种于无组氨酸的培养基上, 观察比较细菌的生长情况。如果经受试 物处理的菌株不能生长在无组氨酸的培养基中, 而经阳性对照物处 理的菌株则可以生长在无组氨酸的培养基上, 则说明经受试物处理 的菌株没有发生突变,试验中所观察到的菌落数增加是假阳性。
) 。 ( 7 ) T4 DNA 连接酶(Invitrogen, Carlsbad ,美国加州)。 ( 8 ) TAE 琼脂糖凝胶(见 12.2.1.1 ) 。 ( 9 ) USP ( United States Pharmacopeia ) 超纯水(Braun Medical In& , Irvine, 美国力口州)。 2.1.3 大肠杆菌电穿孔及噬菌体扩增 ( 1 ) 2YT/carb 培养基:2YT 及 50 μg/ml 羧芐青霉素。 ( 2 ) 羧芐青霉
5.2 吸取10mL上述混悬液,接种于10mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中,置36±1℃培养2h。 5.3 再加入20ml 含20%NaCl的单料胰蛋白胨大豆肉汤,置36±1℃培养24±2h。 5.4 划线转种2个表面干燥的Baird-Parker琼脂平板上,36±1℃培养46±2h。 5.5 挑取可疑菌落移种到肉汤培养基中,置36±1℃温箱培养24h。 5.6 取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验冻干
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